Hematologia

Automatización del Hemograma

Material recopilado por

Carbia C
Fink N
Lazarowski A

INTRODUCCION
La automatización proporciona mayor exactitud
y precisión que los métodos manuales. Durante los
últimos 20 años la automatización reemplazó casi en
su totalidad el recuento manual, con la posible
excepción del recuento de plaquetas con contraste de
fase como un procedimientoconfirmador. Numerosos
fabricantes de instrumentos desarrollaron y comercializaron analizadores hemáticos. En los casos típicos,
estos analizadores proporcionan en menos de un
minutos, los ocho parámetros hemáticos estándar del
hemograma completo [HC], más un recuento diferencial de leucocitos de tres componentes (o cinco componentes en equipos más modernos), en 100 microlitos de sangre entera. Por esto,la automatización
permite el manejo más eficiente de mayor volumen
de trabajo (n° de muestras), así como el diagnóstico y
el tratamiento más oportuno de la enfermedad.
Principios generales del equipamiento
A pesar de la cantidad de analizadores
hemáticos disponibles de fabricantes diferentes y con
los distintos grados de sofisticación y complejidad,
para el funcionamiento se utilizansobre todo dos
principios básicos: la impedancia electrónica (resistencia) y la dispersión óptica. La impedancia electrónica, o la resistencia a la corriente continua (CC) de
bajo voltaje fue desarrollada por Wallace Coulter en
la década de 1950 y es la metodología utilizada con
mayor frecuencia. La radiofrencuencia (RF), o la
resistencia a la corriente electromagnética de alto voltaje a veces seutiliza junto con la impedancia electrónica de la CC. La marca Technicon Instruments introdujo el barrido óptico con campo oscuro en la década
de 1960 y Ortho Diagnostics Systems siguió con un
instrumento óptico basado en láser en la década de
1970. En el equipamiento hemático actual con frecuencia se emplea la dispersión óptica, que utiliza luz
láser y no láser.
Impedancia electrónica
Elprincipio de la impedancia en el recuento de células se basa en la detección y la medición de
cambios en la resistencia eléctrica producida por las
células cuando atraviesan una apertura pequeña. Las
células suspendidas en un diluyente conductor de la
electricidad, como solución fisiológica, se arrastran a
través de una apertura (orificio) en un tubo de vidrio.
En la cámara de recuento, oensamblaje del transductor, se aplica la corriente eléctrica de baja frecuencia entre un electrodo externo (suspendido en la
dilución celular) y uno interno (alojado dentro del
tubo de apertura). La resistencia eléctrica entre los
dos electrodos, o la impedancia en la corriente, se
produce a medida que las células atraviesan la aper-

tura, que tiene sensores y produce pulsos de voltajemedibles (fig. 1). En algunos instrumentos, las pantallas del osciloscopio muestran los pulsos que generan
las células cuando éstas interrumpen la corriente.

Figura 1. Principio Coulter para el recuento celular
El número de pulsos es proporcional al número de células contadas. El tamaño del pulso de
voltaje es directamente proporcional al tamaño (volumen) de la célula, lo que permite ladiscriminación y
el conteo de células de tamaño específico mediante el
uso de circuitos umbral. Los pulsos se reúnen y ordenan (canalizan) según su amplitud mediante analizadores de la altura de los pulsos.
Los datos se trazan en un gráfico de distribución de frecuencia, o histograma de distribución de
tamaño, con el número relativo en el eje Y y el tamaño (número del canal equivalente al tamañoespecífico) en el eje X. El histograma producido representa
la distribución del volumen de las células contadas.
En la figura 2 se ilustra la construcción de un gráfico
de distribución de frecuencia.
Los umbrales de tamaño separan las poblaciones celulares en el histograma, y el recuento corresponde a las células cuantificadas entre los umbrales fijos, inferior y superior, para cada población. Los...