Hematologia

REACCION DEL ACIDO PERYODICO DE SCHIFF (PAS)
FUNDAMENTO
Con esta reacción se ponen en manifiesto los glúcidos presentes en el citoplasma de las células. El acido periódico es un poderoso agenteoxidante que convierte los grupos hidroxilo de los átomos de carbono de los glúcidos en grupos aldehídos. Los dialdehídos resultantes son capaces de combinarse con el reactivo de schiff produciendo uncomponente de color purpura intenso.
La reacción del PAS es positiva en presencia de hidratos de carbono como los polisacáridos, glicoproteínas, glucolipidos... En las células de la sangre, laposibilidad del PAS generalmente indica la presencia de glucógenos.
MATERIAL
-pipetas pasteur
-paralelas
- cristalizadores
- fraco lavador
-cubetas de tinción, una de ellas de cristal negro (se puedeimprovisar envolviendo una cubeta con papel de aluminio)
REACTIVOS
Solución fijadora compuesta por una mezcla de metanol y formol en proporción 9:1
Solución de acido periódico al 1% en aguadestilada
Acido clorhídrico 2N
Solución de metabisulfito sódico al 40% en agua destilada
Reactivo de schiff. Para prepararlo se necesita:
- agua destilada
- pararosanilina
- acido clorhídrico 2N
-metabisulfito sódico en polvo
- carbón activo
- hematoxilina de Harris

MUESTRA
Frotis de sangre periférica o medula ósea reciente y seco.

OBSERVACIONES
1- Colocar los frotis sobre lasparalelas (barras de tinción) y cubrirlos con metanol-formol durante 5 min, a temperatura ambiente, para su fijación.
2- Retirar el metanol-formol por decantación y lavar con agua destilada.
3-Dejar que se sequen al aire.
4- Incubar los frotis durante 7 min en la solución de acido periódico al 1%. Se puede usar una cubeta de tinción o poner los frotis sobre las barras de tinción ycubrirlos con el reactivo; se elije una u otra forma según el número de muestras.
5- Lavar con agua destilada y dejar que se sequen al aire.
6- Incubar durante 1 min en una mezcla recién...