Hematoxilina Eosina

La eosina ya era de uso común a finales del s.XIX, siendo el resultado de la acción del bromo sobre la fluoresceína. Actualmente existen dos compuestos conocidos como eosina y que están íntimamente relacionados:
* la eosina Y (C20H8Br4O5, tetrabromofluoresceína, CI 45380, CI 45386), comúnmente conocida como eosina amarilla
* la eosina B (C20H8Br2N2O9, dibromodinitrofluoresceína, CI 45400),también conocida como eritrosina B azulada.
Ambas, en principio, son intercambiables, sin que sean notables las diferencias entre ellas en el resultado de la tinción, por lo que la preferencia de una sobre otra suele seguir un criterio subjetivo. A pesar de ello, la eosina Y es la mas utilizada en procedimientos rutinarios histológicos, como tinción de contraste en la técnica de la HematoxilinaEosina, y su preparación alcohólica es un paso obligado en la Técnica de Papanicolau.
Homólogos de la eosina son la floxina B (CI 45410), la eritrosina B (CI 45430), el rosa de bengala (CI 45440), el mercurocromo (Merck) y el mercurocromo (Gurr).
...Entonces, cuando una parte del preparado teñido con la técnica de H y E no se tiñe, ¿debo inferir que ahí se encuentra una molécula neutra?
NO. Muchasveces ocurre que vemos una célula cuyo citoplasma no se ha teñido. No necesariamente significa que haya estructuras neutras. Puede darse el caso, como lo representan los lípidos, que no soportan el pasaje de alcoholes de la técnica de H y E. De esta manera, al perderse el contenido, no hay nada que teñir.
Los lípidos tienen una técnica específica que preserva su contenido, llamada Técnica deSudán.
HEMATOXILINA –E OSINA
El procedimiento de coloración de H & E es el siguiente:
1. Desparafinar los cortes en

- xilol -------------------------- 3 minutos - xilol -------------------------- 3 minutos
2. Hidratar los cortes en baños decrecientes de alcohol

- alcohol absoluto (100o) ------3 minutos - alcohol absoluto (100o) ------ 3 minutos - alcohol de 95o ---------------- 3minutos - alcohol de 95o ----------------- 3 minutos - alcohol de 70o ----------------- 3 minutos - agua corriente ----------------- 5 minutos. - agua destilada (2 baños)-------1 minuto (cada uno)
3. Colorear con la solución de hematoxilina. En este paso es conveniente respetar el tiempo de coloración que recomienda cada tipo de solución de hematoxilina. Dependiendo de la fórmula de preparación eltiempo puede variar de 3 a 20 minutos.

La hematoxilina de uso más frecuente es la hematoxilina alumínica de Harris -------3 a 5 minutos
4. Lavado en agua destilada (2 baños)------un minuto cada uno.

5. Diferenciar, para eliminar el exceso de colorante, se emplea el alcohol ácido, hasta que los núcleos y los componentes basófilos de las células sean lo únicos que permanezcan teñidos

-lavar en agua corriente----------------- 2 minutos
6. Virar al color azul, empleando soluciones de:
 Sustancias alcalinas como agua amoniacal
 Solución de bicarbonato de sodio al 2%
 Carbonato de litio al 1%.

- lavar en agua corriente -------------------- 5 minutos - lavar en agua destilada (2 baños ) -------1 minuto c/u.

7. Colorear con una solución alcohólica o acuosa deeosina------------------------------------------ 3 a 5 minutos

8. Deshidratar en baños crecientes de alcohol etílico
- alcohol de 70o ------------------------------- 1 minuto - alcohol de 95o -------------------------------1 minuto - alcohol de 95o --------------------------------1 minuto - alcohol absoluto (100o ) --------------------1 minuto - alcohol absoluto (100o) ---------------------2minutos
9. Diafanizar o aclarar empleando xilol

- xilol ------------------------------------------- 1 minuto - xilol ------------------------------------------- 2 minutos En estas condiciones los tejidos están preparados para realizar en ellos el montaje.
Tinción general. Una de las tinciones más comúnmente usada en histología es la hematoxilina-eosina sobre cortes de parafina. Como vemos se...