HEMOGLOBINA GLUCOSILADA

HEMOGLOBINA
GLUCOSILADA
QUÍMICA CLÍNICA
Profesora: Yahuaca Mendoza Rosalva
Aviles Vaca Sandra Berenice

• La hemoglobina glucosilada (o glicosilada) es una heteroproteina de la
sangre, que resulta de la unión de la hemoglobina con carbohidratos
libres
• LA HEMOGLOBINA A1c
• Es el producto de la condensación irreversible de la glucosa con el
residuo N-terminal de la cadena B de la hemoglobina A.La
concentración de HbA 1c en sangre es directamente proporcional a la
concentración media de glucosa, durante un periodo de tiempo de 120
días.

METODOS

INMUNOTURBIDIMÉTRICOS
• Los métodos se basan en el uso de anticuerpos contra la secuencia de
aminoácidos que varían de 3 a 8 en la fracción N-terminal de la cadena b.
Este principio no detecta otras hemoglobinas glicadas (HbA1a o HbA1b)
nivariantes de hemoglobina tales como HbS, HbF, etc.

INMUNOÁNALISIS ENZIMÁTICO
• Se utiliza una proteasa para digerir la hemoglobina y producir fructosilaminoácido que por la acción de una oxidasa produce peróxido de
hidrógeno.
• Cuatro pasos básicos:
• 1) Hemólisis
• 2) Proteolisis
• 3) Reacción enzimática 1
• 4) Reacción enzimática 2

ELECTROFORESIS,
ISOELECTROENFOQUE:

•

Es una técnica para laseparación de moléculas según la movilidad de
estas en un campo eléctrico. La separación puede realizarse sobre la
superficie hidratada de un soporte sólido (p. ej., electroforesis en papel
de acetato de celulosa), o bien a través de una matriz porosa
(electroforesis en gel), o bien en disolución (electroforesis libre).
Dependiendo de la técnica que se use, la separación obedece en
distinta medidaa la carga eléctrica de las moléculas y a su masa.

CROMATOGRAFÍA DE
INTERCAMBIO
IÓNICO:
• En la este tipo de cromatografía se
emplea una resina de intercambio iónico,
la cual puede estar cargada
positivamente (intercambiadora de
aniones) o negativamente
(intercambiadora de cationes) al
agregarse la muestra que se desea
purificar las partículas cargadas
contrariamente a la resina se unen a ellay son retenidas, las partículas cargadas
igualmente a la resina son rechazadas y
eluyen. La elución de las partículas según
su carga se consigue modificando el pH
del solvente hasta igualarlo a su punto
isoeléctrico.

CROMATOGRAFÍA DE
AFINIDAD

•

Basado en la interacción especifica de dos moléculas (como la de una
hormona con su receptor, o de un anticuerpo con un antígeno), se
añade la mezclade proteínas a la columnas que contiene un polímero
unido a un ligando especifico para la proteína de interés, las otras
proteínas se lavan atreves de la columnas, y al agregar la solución de
ligando eluyen las proteínas de interés. Es un método altamente
efectivo para purificar muestras de proteínas.

HPLC O LPLC
(CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA
DE ALTA EFICACIA):

•

Es una técnica utilizada para separarlos componentes de una mezcla
basándose en diferentes tipos de interacciones químicas entre las
sustancias analizadas y la columna cromatográfica.

• Esta prueba emplea sangre total con EDTA, no requiere de ayuno.
• Valores de referencia:
•Normal (no hay diabetes): menos de 5.7%
•Prediabetes: 5.7 a 6.4%
•Diabetes: 6.5% o más

VENTAJAS
• Mide el promedio de glucosa durante un periodo de 120días.
• No se requiere que el paciente este en ayunas para la toma de muestra.
• Los resultados se pueden correlacionar con valores de glicemia.
• Una vez tomada la muestra siempre y cuando se mantenga en
refrigeración se puede procesar después de 1 semana sin sufrir ninguna
alteración( pacientes del interior)
• Se debe solicitar la prueba entre 2 a 4 veces al año.

LIMITACIONES
• Solo se observan enel caso de formas anormales de hemoglobinas, como
en el de las células falciformes, en este caso por la patología puede que
la hemoglobina A se encuentre disminuida.
• Esto afectara a la cantidad de glucosa que puede unirse a la
hemoglobina, limitando la utilidad de A1c.

• INTERFERENCIAS:
• La presencia de HB f, S + H produce falsos positivos.
• La Hb S, C, E, D, G y de Leproe produce...