hemoglobina

Determinación Espectrofométrica de hemoglobina en unamuestra de sangre
OBJETIVOS
1-Manejar correctamente pipetas automáticas.2-Determinar la concentración de hemoglobina en una muestra desangreutilizando el método espectrofométrico.
FUNDAMENTO TEORICO
La hemoglobina es una proteína conjugada contenida en el interior de loseritrocitos a razón de 300000000 moléculas de hemoglobina porcadaeritrocito en los humanos. Sirve como vehículo para el transporte de oxigenode los pulmones, donde la tensión de O2 es elevada, hacia los tejidos, dondees baja.Una molécula de hemoglobina es un tetrámeroque consta de dos pares decadena de polipéptidos, dos subonidades alfa y dod beta que está enfrentadasentre sí en torno a una cavidad en el centro de la molécula. Cada subunidadcontiene un grupo hemo(región ligante de oxigeno, que contiene un átomo dehierro ferroso), por lo cual una molécula de hemoglobina puede unir 4moléculas de oxigeno.La hemoglobina reducida es hemoglobina con hierro noasociado al oxigeno.Cuando cada grupo hem se asocia con una molécula de oxigeno, lahemoglobina toma la forma de oxihemoglobina.Tanto en la hemoglobina reducida como en la oxihemoglobina, el hierropermanece en estado ferroso (Fe ++. Con el hierro oxidado al estado ferrico seforma Meta hemoglobina y la molécula pierde su capacidad para transportar oxigeno y dióxido de carbono.El método que se utilizarapara realizar esta determinación se denominaMétodo de la Cianometahemoglobina y se fundamenta en que al combinar unvolumen determinado de sangre con una solución que contiene k3fe (CN)6 yKCN (soluciónde Drabkin), el ferrocianuro convierte el hierro ferroso de lashemoglobinas en ferrico, para formar metahemoglobina y la molécula pierdesu capacidad para transportar O2. Luego la meta hemoglobina secombina conel cianuro de potasio para formar cianometahemoglobina de color rojoanaranjado brillante, apto para la determinación calorimétrica.
MATERIALES
-10 tubos de ensayo-1 gradilla-alcohol...