Hibridacion In Situ Delmrna

Tratar con el problema de la no-específica en la hibridaciónin situ del mRNA señales asociadas con los tejidos vegetales sometidos a la muerte celular programada
Jaana Vuosku,  1, 2 Sutela Suvi, una Sääskilahti Mira, un Johanna Kestilä, Jokela Ana 1, 1 Sarjala Tytti, 2 y Hely Häggman un
1 Departamento de Biología de la Universidad de Oulu, PO Box 3000, 90014 Oulu, Finlandia
2 InstitutoFinlandés de Investigación Forestal, Unidad de Investigación Parkano, 39700 Parkano, Finlandia
 El autor correspondiente.
Jaana Vuosku: jaana.vuosku@oulu.fi ; Suvi Sutela: suvi.sutela@oulu.fi ; Mira Sääskilahti: msaaskil@luukku.com ;Johanna Kestilä: kestilaj@paju.oulu.fi , Anne Jokela: anne.jokela@oulu.fi ; Tytti Sarjala: tytti.sarjala@metla.fi ; Hely Häggman: hely.haggman@oulu.fi
Recibido 22 deoctubre 2009; febrero aceptadas 5, 2010.
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Resumen
Antecedentes
La hibridación in situ es un métodomolecular en general suele utilizar para la localización de las transcripciones de ARNm en las plantas. El método proporciona una valiosa herramienta para desentrañar la relación entre la expresión genética y la anatomía, especialmente en especies como los pinos, que muestran gran tamaño del genoma y la escasez de información de la secuencia.
Resultados
En el presente estudio, la expresión del gende la catalasa (CAT) relacionado con el barrido de las especies reactivas del oxígeno (ROS) y los genes relacionados con el metabolismo de poliaminas, diamina oxidasa (DAO) y arginina decarboxilasa (ADC),se localizaron en el desarrollo de pino silvestre ( Pinus sylvestris L.). Además de las señales específicas de ARNm de destino, las sondas de hibridación continuamente no específicamente en laregión que rodea embrión (ESR) del tejido megagametofito, en los restos de los suspensores degenerado, así como en las células de las capas nucelares, es decir, los tejidos expuestos a los procesos de muerte celular y la fragmentación extensa de ácidos nucleicos durante el desarrollo de semillas de pino silvestre.
Conclusiones
En las plantas, la muerte celular es una parte integrante del desarrolloy la defensa, y por lo tanto es un fenómeno común en todas las etapas del ciclo de vida. Nuestros resultados sugieren que el ácido nucleico de la fragmentación extensa durante los procesos de muerte celular puede ser una fuente considerable de señales no específicas en las tradicionales de hibridación in situ del mRNA. De este modo, la visualización de ácido nucleico fragmentación potencial almismo tiempo que el ARNm de ensayo de hibridación in situ que sean necesarias para garantizar la correcta interpretación de las señales en el caso de la hibridación no específica de las sondas en los tejidos vegetales.
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Antecedentes
El ensayo de hibridación in situ que se utiliza para la localización específica de secuencias de ácidos nucleicos en diversos organismos,especies y especímenes es una tecnología de décadas de antigüedad que todavía está en continuo desarrollo y sigue siendo aplicable en muchos contextos modernos, tales como células vivas de imágenes [ 1 ] y el diagnóstico médico [ 2 ]. En los pinos, que muestran tanto la escasez de información de la secuencia y el gran tamaño del genoma, hibridación in situ del mRNA proporciona una herramienta molecularpara una mejor comprensión de los vínculos entre los componentes estructurales y función de los genes.
La muerte celular programada (PCD) es un proceso fundamental celulares implicados en la eliminación selectiva de las células fuera de lugar, no funcional o dañado. En el ciclo de vida de las plantas, los primeros signos de la CPD se ven tan pronto como durante la embriogénesis, cuando las...