HIDROLISIS DE UNA PROTEINA

PRACTICA 6 HIDRÓLISIS DE UNA PROTEINA, ENSAYOS PARA PROTEINAS Y AMINOA-CIDOS


OBJETIVOS:
 Efectuar la hidrólisis total de una proteína
 Identificar algunos aminoácidos presentes en unhidrolizado y proteína, por medio de sus propiedades físico-químicas.
 Identificar por cromatografía en placa fina algunos de los aminoácidos presentes en un hidrolizado de proteína.
OBSERVACIONESLas reacciones de identificación se llevaron a cabo una reacción xantoproteíca la cual es una reacción cualitativa que indica la presencia de proteínas con una coloración amarilla. La reacción deprecipitación nos ayuda a identificar si hay puentes disulfuro esta prueba se realiza con hidróxido de sodio y acetato de plomo al 10%, después un calentamiento a ebullición y agitación por cincominutos da como positiva si se observa un precipitado. La reacción de Biuret se basa en la reacción colorada del reactivo de Biuret la cual produce un complejo de color purpura al reaccionar con unasolución alcalina de sulfato de cobre, los tripéptidos y proteínas reaccionan con este reactivo, los iones cúprico forman un complejo de coordinación con los pares de electrones no compartidos del N,presente en los aminoácidos de las proteínas para llevar a cabo esta reacción colocamos en 6 tubos de ensayo lo siguiente:
Tubo 1: 0.5 ml de agua+ 0.5 ml de NaOH al 10% (tubo testigo)
Tubo 2: 0.5ml de solución C + 0.5 ml de NaOH al 10%.
Tubo 3: 0.5 ml de solución D
Tubo 4: 0.5 ml de solución A + 0.5 ml de NaOH al 10%.
Tubo 5: 0.5 ml de solución D + 0.5 ml de NaOH al 10%.
Tubo 6: 0.5 mlde solución A
A cada tubo se agregó 2 ml de solución de sulfato de cobre al 2%, se agito y observo.
Para la prueba con Ninhidrina que es para la detección y cuantificación de aminoácidos, la cuales un hidrato de triacetona cíclica que cuando reacciona con un aminoácido forma un colorante de apariencia violeta.
Se coloco en 5 tubos de ensaye las siguientes soluciones
Tubo 1: 0.5 m de...