Hidrolisis del almidon

UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

FACULTAD DE MEDICINA
DEPARTAMENTO ACADEMICO DE CIENCIAS DINAMICAS
SECCION DE BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR










LIMA – PERU


I. INTRODUCCIÓN
El almidón es una mezcla de dos polisacáridos, amilosa (10-20%) y amilopectina (80-90%), ambos formados por unidades de glucosa. Laamilosa posee una estructura lineal, mientras que la amilopectina es ramificada. El almidón está presente en el trigo, la patata, el arroz, el maíz, etc., constituyendo la reserva de energía de la mayoría de vegetales, y es la principal fuente de energía de los alimentos que comemos. Para que el cuerpo humano pueda aprovechar la glucosa del almidón es preciso degradarlo previamente. La salivahumana contiene entre 0 y 3 mg/ml de una enzima llamada amilasa salival, capaz de romper los enlaces que unen las moléculas de glucosa en el almidón.
En este presente reporte se quiere anali8zar y comprender de manera clara la hidrólisis enzimática del almidón, entonces para que ocurra ello es necesaria la presencia de sustrato (almidón), enzima (saliva), el Buffer para mantener el pH óptimo y latemperatura a 37 ºC. También se buscará comprobar la presencia de azúcares reductores y polisacárido (almidón)


II. OBJETIVOS

Explicar la actividad de la enzima y la formación de sustrato.
Demostrar experimentalmente la digestión del almidón por la enzima amilasa salival.
Establecer que factores alteran la actividad de la amilasa salival.
Demostrar la presencia de azúcares reductores ydeterminar la presencia de almidón (mediante Lugol).
Diferenciar la reacción química (Benedict) y la reacción física (Lugol).
Promover el trabajo en grupo y la interacción con el profesor.
III. MATERIALES

Solución de HCl 0.5 N
Solución de NaCl 0.9 g%
Buffer fosfato 0.1 M pH 6.8
Almidón 1%
Reactivo de Benedict
Lugol
Agua destilada
12 Pipetas de 2mL, 1mL…
Gradilla
10 tubos de ensayo1 vaso precipitado (beaker)
1 gradilla
Plumón rotulador











IV. RESULTADOS
En la presente práctica de hidrólisis enzimática del almidón, se analizará en primer lugar la reacción de la α-amilasa salival (saliva) sobre el almidón (sustrato), utilizando diferentes métodos y sustancias.
RECOLECCIÓN DE SALIVA
Primero uno de nuestros compañeros se lavó bien la boca tres vecescon agua y juntó toda la saliva posible (10 min) sin formar espuma, para después verter esta en el beaker. A continuación se procede a colocar 1mL de saliva en un tubo de ensayo y la diluimos agregando 4mL de agua destilada (homogenizar bien).

PREPARACIÓN DE DIGERIDOS
Se preparó en tres tubos de ensayo diferentes digeridos, todos conteniendo 2mL de almidón 1% y 1mL de saliva diluida.Siguiendo el orden que se indica a continuación:
Tubos Nº
D1
D2
D3
mL Almidon 1%
2.0
2.0
2.0
mL Buffer pH 6.8 0.1M
1.0
1.0
-
mL NaCl 0.9 g%
1.0
-
-
mL HCl 0.5M
-
-
1.0
mL Agua destilada
-
1.0
1.0
mL Saliva diluida
1.0
1.0
1.0


Imagen: Teóricamente los resultados que se deberían obtener:
(D1) sí habrá hidrólisis enzimática del almidón, (D2) no habrá hidrólisis enzimáticadel almidón, (D3) no habrá hidrólisis enzimática del almidón.



Mezclamos correctamente y llevamos a baño María de 37 ºC durante 10 minutos, tenemos en cuenta que se debe agitar los tubos cada 3 minutos, para que el almidón no tienda a sedimentar. Luego retiramos y agitamos previamente los tubos de la digestión para preparar las siguientes baterías.

Imagen: Con la temperatura y pHsemejado al corporal podemos decir (teóricamente) que los resultados que se obtienen son:
(D1) hidrólisis enzimática del almidón fue rápida. (D2) hidrólisis enzimática del almidón, reacción lenta. (D3) no hubo hidrolisis del almidón por presencia de HCl.




DETERMINACIÓN DE AZÚCARES REDUCTORES

Para este experimento preparamos una nueva batería de 3 tubos...