Hidrolisis del almidon

HIDRÓLISIS DE ALMIDÓN
I. INTRODUCCIÓN

El almidón es un carbohidrato complejo que es degradado por microorganismos que contienen amilasas.
Las moléculas de yodo están atrapadas dentro de la hélice no ramificada de unidades de glucosa de la cadena de amilosa para formar un compuesto de inclusión azul. Si la red se desintegra como ocurre durante la hidrólisis del almidón y las dextrinas pordefinición se produce una mezcla de dos moléculas de polisacáridos poliglucosa: amilosa lineal que solo da glucosa con la hidrólisis se denomina glucosán.

EL almidón sufre hidrólisis por acción de la amilasa, esta puede ser alfa amilasa o beta amilasa, en el caso de la primera la hidrólisis produce principalmente dextrina y en menor proporción la alfa maltosa. La beta maltosa produce alfamaltosa totalmente debido a que actúa desde el extremo no reductor de la cadena, catalizando la hidrólisis del segundo enlace α-1,4, rompiendo dos unidades de glucosa (maltosa) a la vez.
Se necesitan más de 10 unidades de azúcar y a veces hasta miles de unidades para formar los polisacáridos.

La celulosa es el componente principal de las paredes celularesvegetales y está formada por miles deunidades:
1. Homopolisacáridos
Un mismo constituyente en toda la cadena Ej. Almidón, glucógeno, celulosa, inulina
2. Heteropolisacáridos
Diferentes componentes en la cadena ej. Heparina, ácido hialurónico, condroitinas.

II. OBJETIVOS
Verificación la digestión enzimática del almidón
III. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS
EQUIPOS
Estufa
Espectrofotómetro
MATERIALES Y REACTIVOSProporcionado por el laboratorio
Solución de almidón 1 %
Buffer fostato 0.1M, ph 6,6
Solución de cloruro de sodio 0.2 %
Solución enzimática 40%
Hidróxido de bario 0,3 N
Sulfato de zinc 5 %
Solución cúprica alcalina
Solución fosfomolibdica
Tubos de ensayo
Pipetas de 1 y 10 ml
Embudo
Vasos de precipitación
Proporcionado por el alumno
01 YUCA

IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTALPreparación de la muestra problema:
Pesar 1,0 g de yuca
Masticar por 90 veces
Verter el masticado en un matraz
Adicionar 60 ml en un matraz
Incubar a 37°C por 15 minutos
Filtrar a través de una gaza
Centrifugar a 10 000 rpm por espacio de 10 minutos
Obtener el líquido sobrenadante ( muestra problema)



I. Armar el siguiente sistema:
TUBOS (ml)
I
II
III
IV
Solución de almidón 1 %
…3.0
3.0
….
Buffer fostato 0.1M, ph 6,6
0.5
0.5
0.5
….
Solución de cloruro de sodio
0.4
0.4
0.4
….
Pre incubar durante 2 min. A 37 °C
Solución enzimática
1.0
1.0
1.0
….
Mezclar. Incubar durante 20 min. A 37 ° C
Solución Hidróxido de Bario
0.5
0.5
….
….
Solución de sulfato de zinc
0.5
0.5
….
….
Solución de almidón
3.0
….
….
….
Aguadestilada
4.1
4.1
5.1
….
Homogenizar y filtrar con papel del filtro
Filtrado anterior (A)
0.5
0.5
….
….
Muestra problema (B)
….
….
….
0.5
Reactivo de lugol ( gotas )
3-4
3-4
3-4
3-4
Observar y anotar sus resultados. En otra serie de tubos de medir
Filtrado anterior (A)
1.0
1.0
1.0
….
Muestra problema (B)
….
….
….
1.0
Reactivo de Fehling “A”
1.0
1.01.0
1.0
Reactivo de Fehling “B”
1.0
1.0
1.0
1.0
Someter a ebullición en baño maría por espacio de 5-8 minutos. Observar y anotar sus resultados.







V. RESULTADOS




























VI. DISCUSIÓN
La amilasa es una enzima que actúa en los procesos de digestión de carbohidratos, específicamente actúa sobre el almidón, es una enzimaglucolítica, su función es hidrolizar los enlaces glucosídicos del tipo alfa 1,4 de la fracción amilosa de la molécula de almidón.
La alfa-amilasa cataliza la hidrólisis de la cadena lineal (amilosa) y la ramificada (amilopectina) del almidón, rompiendo enlaces 1,4 interiores (endoamilasa) para formar una mezcla de dextrinas.
Por ello se la conoce como enzima dextrinogénica (mezcla de amilodextrina,...