Hierro

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Pág. 1: Método colorimétrico directo para la determinación de hierro en suero y/o plasma empleando ferene Pág. 4: Evaluación del Wiener lab. Counter 19 - Parte II

Boletín del Servicio Bibliográfico de Wiener Laboratorios S.A.I.C. http//:www.wiener-lab.com.ar

Año XLII - Setiembre 2008

Director: Gustavo A. Capriotti - Redactor: Cristina M. Crepaldo - Editor Responsable: WienerLaboratorios S.A.I.C. - 2000 - Rosario - Argentina

METODO COLORIMETRICO DIRECTO PARA LA DETERMINACION DE HIERRO EN SUERO Y/O PLASMA EMPLEANDO FERENE
Yovaldi, P.; Capriotti, G. Centro de Investigación y Biotecnología, Wiener lab., Rosario, Argentina. pyovaldi@wiener-lab.com.ar

El presente estudio tiene como objetivo la evaluación de un método colorimétrico para la determinación de hierro ensuero o plasma. Las técnicas fotométricas para la determinación de hierro en suero se basan en la formación de un complejo con un cromógeno. El presente método emplea ferene, un agente quelante, con el objetivo de aumentar la sensibilidad del ensayo. El kit en estudio mostró muy buena sensibilidad, exactitud y robustez, siendo fácilmente adaptable a analizadores automáticos.
se mide a 600 nm. Laabsorbancia obtenida es directamente proporcional a la concentración de hierro. Este nuevo kit está basado en el método colorimétrico directo Ferene para cuantificar hierro sin desproteinización.

Introducción y objetivos
1098765432 10987654321 1 10987654321 10987654321 10987654321 10987654321 1 10987654321 10987654321 10987654321 10987654321 1098765432

l hierro se distribuye en el organismo dediferentes maneras, incluyendo hemoglobina, hierro tisular y mioglobina. El transporte de hierro de un órgano a otro se realiza mediante unión de hierro en una proteína llamada transferrina. La ferritina se encuentra en casi todas las células del cuerpo, constituyendo una reserva de hierro disponible para la formación de la hemoglobina y otras proteínas que contienen el grupo hemo. Tanto ferritinacomo transferrina están presentes en las células de la mucosa intestinal y juntas regulan la absorción de hierro. Los mayores desórdenes del metabolismo de hierro se relacionan con su deficiencia o exceso, sin embargo, se han observado alteraciones por enfermedades cardiovasculares y renales, hepatitis crónica e infecciones. La anemia por pérdida de hierro representa uno de los trastornosorgánicos

E

más frecuentes, especialmente en niños, mujeres jóvenes y ancianos. Por el contrario, el exceso de hierro se asocia con otros desórdenes, como hemosiderosis, hemocromatosis y anemia sideroblástica. Las técnicas fotométricas para la determinación de hierro en suero se basan en la formación de un complejo con un cromógeno, entre los cuales ferrozina y batofenantrolina han sido ampliamenteusados. El presente método emplea ferene, un agente quelante adicional, con el objetivo de aumentar la sensibilidad del ensayo colorimétrico. Este compuesto presenta una elevada absortividad molar, es más sensible que ferrozina y facilita la detección de hierro.

Principio
pH apotransferrina + Fe3+ > Fe2+ > complejo azul

ácido ascórbico

Fe3+ Fe2+ + Ferene

Resultados
El kit (Fer-colorAA líquida, Wiener lab.) mostró muy buena performance en todos lo equipos en los que fue ensayado. Los estudios de validación se llevaron a cabo en forma manual y en analizadores automáticos. Se citan a continuación los resultados más relevantes.

Fundamentos del método
El hierro se libera del complejo de transferrina en medio ácido y se reduce a Fe (II) con ácido ascórbico. Seguidamentereacciona con el reactivo de color, ferene, dando un complejo de color azul que

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§ Método colorimétrico directo para la determinación de hierro...

Exactitud Fer-color AA líquida posee una importante capacidad para medir bajas concentraciones de hierro con exactitud. Se midieron concentraciones de analito en sueros controles comerciales. Todos los valores se encontraron dentro del rango...