Higado Informe

PRACTICA: DETERMINACIÓN DE GLUCÓGENO HEPÁTICO
Objetivo:
Determinar cuantitativamente el contenido de glucógeno en el hígado.
Extracción del glucógeno hepático:
El glucógeno se encuentraprincipalmente en el hígado y musculo donde constituye las reservas importantes de alimentos.
El glucógeno es una estructura ramificada que resulta de la unión entre el carbón 1 de la molécula de glucosa queinicia una cadena con el carbono 6 de una molécula de glucosa situada en el medio de otra cadena. Para reducir este enlace 1-6 se necesita una enzima denominada enzima ramifican te (alfa 1,4 glucan:alfa 1,4 glucan 6 glicosiltransferasa) que transfiere parte de una cadena 1-4 gluconica desde una posición 6 de la misma cadena.
En el hígado este glucógeno puede transformarse gracias a la presenciade la enzima fosforilasa en G-1P, luego por acción de la fosfoglucomutasa de G-6-P y sobre esta actúa la enzima G-6-fosfatasa para transformarla en glucosa la que es liberada a la sangre como glucosalibre.
Material y reactivos:
Ácido sulfúrico concentrado
Etanol 96°
Hidróxido de potasio 30%
Solución indicadora antrona 5mg% 2ml
Muestra de hígado
Centrifuga
Procedimiento:
1. Pesar 0,5g de hígado,colocar en un tubo de ensayo y agitar con 1ml de KOH concentrado
2. Calentar suavemente el tubo hasta observar completa disolución de las proteínas
3. Cuando enfrié añadir 3ml de agua destilada
4.Agregar 5 ml de etanol al 95%
5. Observar el precipitado, centrifugar por 3 minutos
6. Eliminar el líquido y disolver el residuo en 100ml de agua destilada
7. Anotar el volumen final
8. Determinación:tubos
1
2
ml solución standard 5mg% glucosa
1.0
…..
ml de solución problema
……
1.0
Indicador gota a gota
3
3
ml ácido sulfúrico concentrado
5
5

6.- colocar los tubos en agua fría mientras se agregael ácido sulfúrico concentrado

X1 .100= MG DE GLUCOGENO EN 0,5 G DE HIGADO
0,5GR DE HIGADO-----MG DE GLUCOGENO
40,04GR DE HIGADO TOTAL----X2
X2=________ MG DE GLUCOGENO
40,04G H.T,-----------100%...