histologia manual desgaste de hueso

TÉCNICAS PARA EL ESTUDIO DEL TEJIDO ÓSEO
El tejido óseo junto con el cartilaginoso son las variedades del conjuntivo que conocemos como modeladas, ya que constituyen por separado o preferentemente juntos y combinados con otros tejidos como el fibroso denso, nuestro sistema esqueletógeno.
Método por desgaste

Una de las tecnicas histologicas mas dificil de lograr resultados optimos es laobtencion de muestras de hueso por desgaste, debido a que por la fragilidad de la lamina de hueso obtenida, se rompe con suma facilidad o presenta ralladuras que no pueden eliminarse; por esta razon nos propusimos buscar una variante de tecnica para mejorarla.
Si la fragilidad se debia a la excesiva sequedad del hueso, habria que eliminarla, para lo cual colocamos las muestras previamente en aceite,agua, alcohol y por varios dias, los resultados de las muestras tratadas con aceite fueron excelentes.
Muestras de femur ,Motor dental y lijas ,Azul de anilina ,Aceite, agua, alcohol y papaína Alcohol, xilol y bálsamo de Canadá ,Microscopio, lamina porta y cubreobjetos.
Luego, procedimos a seccionar las diáfisis en cortes longitudinales y transversales de aproximadamente 0,3 cm de espesor,colocamos los cortes en agua, alcohol, aceite y papaina durante diez dias, desgastamos el hueso con el motor dental y discos de carburundum, hasta alcanzar un espesor aproximado de 0,1 cm y se sumergen nuevamente en las sustancias mencionadas, seguir desgastando luego con un lijar mas fino, agua y una plancha de vidrio, hasta alcanzar una muestra transparente y flexible, luego finalmente se procedea la tincion y montaje.
Las muestras tratadas presentaron claras diferencias. Las muestras tratadas con alcohol, agua y papaína, presentan arañones por el desgaste y pulido.
La muestra sumergida en aceite es optima debido a que el aceite evita que la muestra sufra rajaduras, a pesar de haber seguido el mismo procedimiento que las anteriores. nización de la matriz, si bien en este caso no sepreserva el compartimento orgánico.
Método de descalcificación
Se denomina decalcificación a la completa eliminación de las sales Calcio presentes en los tejidos tras haber realizado su fijación. Éste procedimiento se realiza de forma sistemática sobre tejidos mineralizados (dientes y huesos= y esporádicamente sobre material anatomopatológico con calcificaciones que puedan dificultar o impedir laobservación al microscopio. Solo está desaconsejado decalcificar el tejido en las enfermedades óseas metabólicas donde nos interesa valorar el equilibrio entre síntesis y destrucción de matriz ósea y su grado de calcificación. En éste último caso utilizaríamos un microtomo motorizado específico para tejidos duros.
Decalcificación química:
Los principales agentes decalcificadotes están formadospor ácidos fuertes o débiles empleados solos o en conjunción a distintos líquidos fijadores. Los principales reactivos que se utilizan son ácidos inorgánicos fuertes como el acido nítrico o el clorhídrico y débiles como el acido sulfuroso y también ácidos orgánicos como el acido fórmico el acético y el tricloroacético. Todas estas sustancias tiene la ventaja de ser estables, baratas y de fácildisponibilidad.
Un líquido decalcificante ideal debe reunir una serie de cualidades. Estas cualidades son las siguientes:
Debe producir una eliminación completa de los depósitos cálcicos.
No debe provocar efectos indeseables o artefactos sobre los tejidos tratados.
No interferir con los procedimientos de tinción que se emplean posteriormente.
El agente mas rápido y eficaz es el acido nítrico y seemplea en soluciones del 5 al 7.5%. El problema que tiene es que utilizado a concentración elevada, por encima del 6% es que tiende a producir gran destrucción tisular que se atenúa en disolución alcohólica.
Ácido clorhídrico: no es tan rápido como el nítrico pero produce menor agresión tisular y no precisa lavado post-decalcificación.
Los ácidos orgánicos: producen escasos artefactos...