Histología con uso de microondas

Int. J. Morphol., 26(2):317-324, 2008.

Procesamientos Histológicos Convencional y en Microondas: Comparación Histológica, Histoquímica e Inmunohistoquímica
Conventional and Microwave Histological Processing: A Histological, Histochemical and Inmunohistochemical Comparison
Andrés Estay Freire; Roxana Parra Lara & Hugo Benítez Cáceres

ESTAY, F. A.; PARRA, L. R. & BENÍTEZ, C. H.Procesamientos histológicos convencional y en microondas: Comparación histológica, histoquímica e inmunohistoquímica. Int. J. Morphol., 26(2):317-324, 2008. RESUMEN: El horno microondas (HM) fue introducido en Anatomía Patológica en los años 80, siendo utilizado en varios procesos dentro del laboratorio. Se realizó la comparación de algunos parámetros histológicos, histoquímicos e inmunohistoquímicos enmuestras de tejido normal, procesados paralelamente de manera convencional y en HM. Se seleccionaron muestras en duplicado de diversos tejidos; se procesaron convencionalmente (PC) en un procesador automático y en HM utilizando un protocolo estandarizado previamente. Se realizaron tinciones histológicas e histoquímicas (H-E, PAS y Azul Alcián) e inmunohistoquímicas (CD45, CD3, CD20 CitoqueratinasAE1/AE3, 5/18, 20, S-100, Receptores de Estrógeno y Progesterona). Las técnicas se escogieron según tipo de tejido. Se evaluó la calidad de los preparados (tinción nuclear, tinción citoplasmática y calidad general), la intensidad de las tinciones histológicas, histoquímicas e inmunohistoquímica de marcadores escogidos. El HM posibilitó la entrega de la lámina histológica en un tiempo mucho menor que elPC, disminuyendo el tiempo de procesamiento de 12 a 1 hora. Se observó una contracción mayor en las muestras procesadas en HM que en sus pares procesadas convencionalmente: tonsila palatina (54,8% v/s 46,6%), intestino grueso (33,3% v/s 22,2%), piel (24,1% v/s 13,7%) y mama (15,1% v/s 26,3%). La calidad del corte histológico fue mayor en las muestras PC, observando en los tejidos HM una tinciónmenos homogénea, con agrietamientos y desprendimientos más notorios, siendo igualmente apropiadas para el diagnóstico histológico. En cuanto a las tinciones histoquímicas, no se observaron cambios significativos. Se observó una mayor intensidad de tinción inmunohistoquímica de proteína S-100 y citoqueratina AE1/AE3 en piel. Se concluyó que el HM convencional puede ser utilizado en el procesamientode biopsias sin inconvenientes para el diagnóstico anatomopatológico. PALABRAS CLAVE: Microondas; Procesamiento histológico; Inmunohistoquímica.

INTRODUCCIÓN

El horno microondas (HM) fue introducido en los laboratorios de Anatomía Patológica en la década de los 80. Actualmente se utiliza en múltiples procesos de fijación (Boon et al., 1988; Hafajee & Leong, 2004), técnicas histológicas ehistoquímicas (Boon & Kok, 1989), recuperación antigénica para inmunohistoquímica (Kumada et al., 2004), descalcificación de tejidos (Keithley et al., 2000), etc. Esto se basa en la cualidad del microondas de excitar y movilizar moléculas de agua, lo que permite acelerar los procesos químicos involucrados en tales procedimientos. En este sentido se ha propuesto la utilización del HM en elprocesamiento histológico, en el que las moléculas de agua son desplazadas por moléculas móviles de solventes que permiten la entrada de hidrocarburos como la parafina histológica (Boon & Kok; Giberson & Demaree, 2001). El objetivo de
Unidad de Anatomía Patológica, Hospital Regional Antofagasta, Chile.

este trabajo fue comparar parámetros histológicos, histoquímicos e inmunohistoquímicos en muestras detejido normal, procesados paralelamente de manera convencional y en horno HM doméstico.

MATERIAL Y MÉTODO

Se tomaron muestras en duplicado de tejido de tonsila palatina, intestino grueso, piel y mama. Las muestras fueron medidas con un cáliper digital y fijadas en formalina tamponada al 10%. Se estableció como estándar el procesamiento convencional (PC) nocturno realizado en un equipo...