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Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas

Métodos de análisis

Práctica No. 2:
Separación de una mezcla de azul de metileno y fluoresceína usandocromatografía por adsorción.

Vázquez Peláez Michelle
Sección 2
5QV1


Introducción:
La cromatografía es una técnica que permite la separación de los componentes de una mezcla debido a la influencia de dosefectos contrapuestos.
a) Retención: Efecto producido sobre los componentes de la mezcla por una fase estacionaria, que puede ser un sólido o un líquido anclado a un soporte sólido.
b)Desplazamiento: Efecto ejercido sobre los componentes de la mezcla por una fase móvil, que puede ser un líquido o un gas.
El fenómeno de migración de los componentes de una mezcla a lo largo de la faseestacionaria, impulsados por la fase móvil, recibe el nombre de elución.
La elución es la extracción de una sustancia absorbida desde una columna de cromatografía con un material poroso mediante unvolumen de líquido.
En general, hay pocos métodos para el análisis químico que son específicos para una sola especie. La separación del analito de las posibles interferencias suele ser una etapa muyimportante en los procedimientos analíticos.
En varios tipos básicos de cromatografía la fase móvil es un líquido. Estos tipos se clasifican de acuerdo con el mecanismo de separación o el tipo de faseestacionaria.
Entre estos tipos están:
1) cromatografía de reparto
2) cromatografía de adsorción o cromatografía líquido-sólido
3) cromatografía de intercambio de iones o cromatografía iónica
4)cromatografía de exclusión por tamaño
5) cromatografía por afinidad
6) cromatografía quiral.

Objetivos:
 Aplicar la técnica de cromatografía por adsorción para la separación de doscolorantes.
 Comprobar la separación con base al perfil de elución.


Resultados:

Tabla 1. Valores de absorbancia obtenidos para la separación de fluoresceína y azul de metileno.
Tubo No. Volumen de...