hola trabajo

Organelos Separación
En los años 1950 y 1960, los científicos utilizaron dos técnicas para el estudio de células
orgánulos: microscopía y fraccionamiento. Christian de Duve estaba en
la vanguardia de fraccionamiento celular. A principios de la década de 1950, utilizó
centrifugación para distinguir un nuevo orgánulo, el lisosoma, desde
fracciones previamente caracterizados: el núcleo, lasmitocondrias-rica
fracción y los microsomas. Poco después, él utilizó equilibriumdensity
centrifugación para descubrir otro orgánulo.
fondo
Las células eucariotas están muy organizadas y compuestas de células
estructuras conocidas como orgánulos que realizan funciones específicas.
Aunque la microscopía ha permitido a los biólogos para describir
la ubicación y el aspecto de distintosorgánulos, es de
uso limitado en el descubrimiento de la función del orgánulo. Para ello,
biólogos celulares se han basado en una técnica conocida como fraccionamiento de la célula.
Aquí, las células se rompen abierto, y los componentes celulares
están separados sobre la base de su tamaño, masa, densidad y
usando una variedad de técnicas de centrifugación. científicos
a continuación, podría aislar yanalizar los componentes celulares de diferente
densidades, llamados fracciones. El uso de este método, los biólogos tenían
divide la célula en cuatro fracciones: núcleos, mitochondrialrich
fracción, microcosmos y jugo celular.
de Duve fue un bioquímico interesado en el subcelular
ubicaciones de las enzimas metabólicas. Ya había completado
un gran cuerpo de trabajo en el fraccionamiento delas células del hígado, en
que había determinado la localización subcelular de numerosos
enzimas. Mediante la localización de estas enzimas en la celda específica
fracciones, que podrían empezar a dilucidar la función del orgánulo.
Ha señalado que su trabajo se basó en dos hipótesis:
el "postulado de la homogeneidad bioquímica" y
"El postulado de una sola ubicación." En resumen, estashipótesis
proponer que la totalidad de la composición de una población subcelular
contendrá las mismas enzimas, y que cada enzima
está situado en un sitio discreto dentro de la célula. armado con
estas hipótesis y la poderosa herramienta de centrifugación, de
Duve subdividido aún más la fracción mitocondrial-rica
En primer lugar, se identifica la fracción mitocondrial luz, que es
compuesta deenzimas hidrolíticas que ahora se sabe que componer
el lisosoma. Entonces, en una serie de experimentos se describe
aquí, identificó otra fracción subcelular discreta,
que llamó perioxisome, dentro del mitochondrialrich
fracción.
El Experimento
de Duve estudió la distribución de enzimas en las células de hígado de rata.
Gran actividad en el metabolismo de la energía, el hígado contiene un
númerode enzimas útiles para estudiar. Para buscar la presencia
de diversas enzimas durante el fraccionamiento, se basó en
pruebas conocidas, llamados ensayos de enzimas, para la actividad enzimática. a
mantener la máxima actividad enzimática, tuvo que tomar precauciones,
que incluía la realización de todas las etapas de fraccionamiento a 0 ° C, ya
proteína se desnaturaliza el calor que puedacomprometer la enzima
actividad.
de Duve utiliza centrifugación zonal de tasa-de separar celular
componentes por sucesivas etapas de centrifugación. Quitó
hígado y de la rata rompió aparte de homogeneización.
La preparación cruda de células homogeneizadas, a continuación, se sometió
a relativamente baja velocidad de centrifugación. Este paso inicial
separados del núcleo de la célula, que recogecomo sedimento en el
parte inferior del tubo, a partir del extracto citoplásmico que permanece
en el sobrenadante. A continuación, de Duve subdivide
el extracto citoplásmico en la fracción mitocondrial pesada,
la luz fracción mitocondrial, y la fracción microsomal. él
logrado separar el citoplasma mediante el empleo de éxito
etapas de centrifugación sucesivos de fuerza cada vez mayor....