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Problema
Se desean estudiar las propiedades de una enzima que se encuentra en plantas. Para ello se ha diseñado un método de purificación con el que se pretende obtener esta enzima en condicionesnativas, y se han realizado algunos análisis de sus propiedades.
Fracción | Actividad (Ue/ml) | Proteína (mg/ml) | Actividad Específica | Factor de Purificación | Rendimiento % total | Rendimiento %respecto a (n-1) |
Extracto crudo | 342 | 57 |  6 |  - | -  | -  |
Ppdo. de sulfato de amonio | 653 | 36 |  18,2 |  3 |  190,9 | 190,9  |
Precipitación isoeléctrica | 1262 | 3 | 420,7  |  70,1|  369 |  193,3 |
Cromatografía en DEAE-celulosa | 433 | 1,3 |  333 |  55,5 |  126.6 |  34,3 |
Concentrado de proteína | 1068 | 2,5 |  427,2 | 71,2  |  312,3 |  246,6 |
| | | | | | |Para la purificación de esta enzima usted partió de hojas de espinaca y obtuvo un extracto crudo de 72 ml. Seguidamente se precipitó con sulfato de amonio por agregado de 117 ml de solución saturada dedicha sal. Luego de separar el precipitado, el mismo se resuspendió en buffer pH 7.0 en un volumen final de 25 ml. A esta fracción se la precipitó isoeléctricamente y se separó el precipitado delsobrenadante mediante centrifugación. La fracción conteniendo la enzima (precipitado) se resuspendió en 7,5 ml de buffer pH 7 y se practicó cromatografía en DEAE-celulosa. Se juntaron todas las fraccionescorrespondientes al pico de actividad (volumen total 7,2 ml). Como último paso se realizó una concentración de la muestra. A todas las fracciones de la purificación se les midió actividad de laenzima y concentración de proteínas por el método de Lowry (0,2 ml de muestra en el tubo de colorimetría de volumen final 1,3 ml)

Los resultados que obtuve (en rojo) están calculados según :
* Act.Específica= Act. Total /Cantidad de Proteína
* Factor de purificación = (Act. Esp. x n)/(Act. Esp. x (n-1))
* Rendimiento total = (Act. Total/Act. Total inicial) x 100
* Rendimiento %...