Homeostasis

1. Introducción

Estudios recientes han demostrado esa inflamación inducida por la inyección intranigral de lipopolisacárido (LPS) conducida a la pérdida selectiva de las neuronas de dopamina (DA) nigral y extensa activación de la microglía (Castaño et al., 1998; Herrera et al., 2000; Gao et al., 2002; Arimoto y Bing, 2003). Nuestros estudios previos demostraron que los fetos de ratasexpuestos a lipopolisacárido bacteriano en el día embrionario 10.5 (E10.5) dio lugar a un nacimiento de animales con las neuronas DA menos de lo normal (Ling et al., 2002) junto con muchas otras características en la enfermedad de Parkinson (PD). Éstos sugieren que exposición prenatal LPS potencialmente puede modelar el PD. Una característica llamativa de prenatal modelo LPS PD es el efecto sinérgico deexposición LPS prenatal y postnatal toxina exposición sobre la toxicidad de la neurona DA. Ratas exponen prenatalmente a LPS mostrados mayor sensibilidad a la infusión de la rotenona intra yugular dosis bajas (Z. Ling et al., 2004) o supranigral la infusión de dosis baja LPS (Ling et al., 2006). Estos animales perdieron mayor cantidad de neuronas DA y tuvieron importantes aumentos en el número demicroglia reactivo y los niveles de proinflammatory citocinas factor de necrosis tumoral alfa (TNF-a) en el nigra del substantia (SN). Sin embargo, los mecanismos subyacentes a estas diferencias fueron unidentified.

Glutatión (GSH) es un importante antioxidante soluble presente en altas concentraciones en el cerebro (Dringen et al., 2000). Estudio post mortem ha demostrado que había un 40%disminución de la forma reducida de glutatión en los pacientes con SN de EP (Sian et al., 1994). Además, se propuso que la depleción de GSH es el primer indicador de estrés oxidativo durante el proceso de PD (Bharath et al., 2002). Estudio in vitro han demostrado que LPS tratamiento disminuyó los niveles de GSH en astrocitos en culturas mesencefálicas de manera dosis dependiente (Bharath et al., 2002).Esto sugiere que insulto LPS puede causar depleción de GSH en células gliales que pueden contribuir a la pérdida de neuronas DA mayor vista en el modelo LPS PD prenatal.

Por lo tanto, el presente estudio establecidos para evaluar los efectos de la exposición prenatal de LPS en metabolismo del glutatión en el cerebro de la rata. Las actividades de la enzima principal en la síntesis de novo GSH,redox ciclismo y glutatión utilizaciones también fueron evaluadas y en comparación con un modelo agudo mediante administración de LPS supranigral. Los resultados en el estudio actual destacan la homeostasis del glutatión alterado en los animales expuestos prenatalmente a LPS, que pueden contribuir a la susceptibilidad creciente de estos animales a un insulto secundario neurotoxina.

2.Experimentales procedimientos

2.1. Prenatal tratamiento LPS

Temporizado-grávido hembras Sprague–Dawley (SD) (Zivic-Miller, Allison Park, PA) se mantuvieron en un Animalario ambientalmente regulado por la duración del estudio. En el día embrionario 10.5, cada hembra grávida recibió una sola inyección (i.p.) de ambos LPS (Sigma, St. Louis, MO; serotipo de Escherichia coli 026:B6; L-8274; endotoxina10.000 unidades/kg) o solución salina. Dosis y tiempo fue elegido según nuestro estudio anterior (Ling et al., 2002). Los animales se les permitió entregar normalmente. Cachorros fueron destetados después de 21 días. Luego un macho cachorro de cada camada fue elegido y asignado al azar a uno de los ocho grupos (n = 5 por grupo de tratamiento prenatal/edad). Después de 4 a 17 meses, las ratas fueronanestesiadas con pentobarbital sódico (40 mg/kg, i.p.) y fusionados por transcardially con solución salina helada. Entonces los cerebros fueron rápidamente extraídos y congelados en el 2-Metilbutano y guardados en 80 8 menos de 2 meses para las evaluaciones de bioquímicas. Para la tinción inmunohistoquímica, los hermanos de camada fueron perfundidos con solución salina fría seguida de perfusión...