Hongos Y Parasitos
Páginas: 5 (1028 palabras)
Publicado: 3 de julio de 2012
FUNDAMENTOS DE MICROBIOLOGÍA
PRÁCTICA DEL APRENDIZAJE N° 2
a) Visite un laboratorio de bacteriología de su lugar de trabajo ( o solicite coocurrir al laboratorio de un hospital cercano), y acuerde con el responsable del laboratorio, un horario para realzar las prácticas.
b) Observe cómo se realiza una coloración de Gram y observe al microscopio para diferenciar Gram (+) y Gram (-),formas (bacilos, cocos) y agrupaciones.
c) Observe las condiciones de cultivo para bacterias y hongos. Preste atención, en las composiciones de los medios, temperatura y tiempos de incubación. Anote las diferencias.
d) Realice una observación macroscópica y microscópica de las formas infectantes de los parásitos.
e) Registre lo observado y redacte un informe final escrito de laactividad. Comente los resultados con sus compañeros de asesoría.
DESARROLLO
COLORACIÓN DE GRAM
• Se recoger las muestras.
• Se hace un extendido en espiral.
• Dejar secar a temperatura ambiente.
• Fijar la muestra con metanol durante un minuto o al calor (flameado 3 veces aprox.)
• Agregar azul violeta (cristal violeta o violeta de genciana) y esperar 1 min. Todas las célulasGram positivas y Gram negativas se tiñen de color azul-purpura.
• Enjuagar con agua.
• Agregar lugol y esperar entre 1 minuto
• Enjuagar con agua.
• Agregar acetona y/o alcohol y esperar 4 segundos (parte critica de la coloración)
• Enjuagar con agua.
• Tinción de contraste agregando safranina o fucsina básica y esperar 1-2 min Este tinte dejará de color rosado-rojizo las bacteriasGram negativas.
El cristal violeta (colorante catiónico) penetra en todas las células bacterianas (tanto Gram positivas como Gram negativas) a través de la pared bacteriana. El lugol es un compuesto formado yodo en equilibrio con yoduro de potasio, el cual está presente para solubilizar el yodo, y actúa de mordiente, haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a la pared de lacélula bacteriana. El yodo entra en las células y forma un complejo insoluble en solución acuosa con el cristal violeta.
A partir de la tinción de Gram pueden distinguirse varios morfotipos distintos: Los cocos son de forma esférica. Pueden aparecer aislados después de la división celular (Micrococos), aparecer por pares (Diplococos), formar cadenas (Estreptococos), o agruparse de manera irregular(Estafilococos).
Los bacilos poseen forma alargada. En general suelen agruparse en forma de cadena (Estreptobacilos).
También pueden distinguirse los espirales, que se clasifican en espirilos si son de forma rígida o espiroquetas si son blandas y onduladas. Si por el contrario, poseen forma de "coma", o curvados, entonces se los designa vibrios.
[pic] [pic]
CocosGram positivos Cocos Gram negativos
MEDIO DE CULTIVOS DE LAS BACTERIAS
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presión de oxígenos adecuados, así como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debecontener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante.
La mayoría de las bacterias patógenas requieren nutrientes complejos similares en composición a los líquidos orgánicos del cuerpo humano. Por eso, la base de muchos medios de cultivo es una infusión de extractos de carne y Peptona a la que se añadirán otros ingredientes.
En losdiferentes medios de cultivo se encuentran numerosos materiales de enriquecimiento como hidratos de carbono, suero, sangre completa, bilis, etc. Los hidratos de Carbono se adicionan por dos motivos fundamentales: para incrementar el valor nutritivo del medio y para detectar reacciones de fermentación de los microorganismos que ayuden a identificarlos. El suero y la sangre completa se añaden para...
PRÁCTICA DEL APRENDIZAJE N° 2
a) Visite un laboratorio de bacteriología de su lugar de trabajo ( o solicite coocurrir al laboratorio de un hospital cercano), y acuerde con el responsable del laboratorio, un horario para realzar las prácticas.
b) Observe cómo se realiza una coloración de Gram y observe al microscopio para diferenciar Gram (+) y Gram (-),formas (bacilos, cocos) y agrupaciones.
c) Observe las condiciones de cultivo para bacterias y hongos. Preste atención, en las composiciones de los medios, temperatura y tiempos de incubación. Anote las diferencias.
d) Realice una observación macroscópica y microscópica de las formas infectantes de los parásitos.
e) Registre lo observado y redacte un informe final escrito de laactividad. Comente los resultados con sus compañeros de asesoría.
DESARROLLO
COLORACIÓN DE GRAM
• Se recoger las muestras.
• Se hace un extendido en espiral.
• Dejar secar a temperatura ambiente.
• Fijar la muestra con metanol durante un minuto o al calor (flameado 3 veces aprox.)
• Agregar azul violeta (cristal violeta o violeta de genciana) y esperar 1 min. Todas las célulasGram positivas y Gram negativas se tiñen de color azul-purpura.
• Enjuagar con agua.
• Agregar lugol y esperar entre 1 minuto
• Enjuagar con agua.
• Agregar acetona y/o alcohol y esperar 4 segundos (parte critica de la coloración)
• Enjuagar con agua.
• Tinción de contraste agregando safranina o fucsina básica y esperar 1-2 min Este tinte dejará de color rosado-rojizo las bacteriasGram negativas.
El cristal violeta (colorante catiónico) penetra en todas las células bacterianas (tanto Gram positivas como Gram negativas) a través de la pared bacteriana. El lugol es un compuesto formado yodo en equilibrio con yoduro de potasio, el cual está presente para solubilizar el yodo, y actúa de mordiente, haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a la pared de lacélula bacteriana. El yodo entra en las células y forma un complejo insoluble en solución acuosa con el cristal violeta.
A partir de la tinción de Gram pueden distinguirse varios morfotipos distintos: Los cocos son de forma esférica. Pueden aparecer aislados después de la división celular (Micrococos), aparecer por pares (Diplococos), formar cadenas (Estreptococos), o agruparse de manera irregular(Estafilococos).
Los bacilos poseen forma alargada. En general suelen agruparse en forma de cadena (Estreptobacilos).
También pueden distinguirse los espirales, que se clasifican en espirilos si son de forma rígida o espiroquetas si son blandas y onduladas. Si por el contrario, poseen forma de "coma", o curvados, entonces se los designa vibrios.
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CocosGram positivos Cocos Gram negativos
MEDIO DE CULTIVOS DE LAS BACTERIAS
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presión de oxígenos adecuados, así como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debecontener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante.
La mayoría de las bacterias patógenas requieren nutrientes complejos similares en composición a los líquidos orgánicos del cuerpo humano. Por eso, la base de muchos medios de cultivo es una infusión de extractos de carne y Peptona a la que se añadirán otros ingredientes.
En losdiferentes medios de cultivo se encuentran numerosos materiales de enriquecimiento como hidratos de carbono, suero, sangre completa, bilis, etc. Los hidratos de Carbono se adicionan por dos motivos fundamentales: para incrementar el valor nutritivo del medio y para detectar reacciones de fermentación de los microorganismos que ayuden a identificarlos. El suero y la sangre completa se añaden para...
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