hongos


Aislamiento e Identificación del Hongo Mitospórico Oportunista Curvularia sp.
Universidad de Puerto Rico Recinto de Mayagüez, Departamento de Biología
Natalia E. Llaurador Caraballo

Introducción
Un hongo oportunista es considerado como flora normal del cuerpo, pero también se encuentran en la naturaleza mayormente como organismos saprófitos. En el momento en el que el sistemainmunológico de un individuo se encuentre comprometido, pueden llegar a producir enfermedades que varían en su nivel de gravedad. La mayoría de los hongos oportunistas comunes son considerados hongos mitospóricos, los cuales constituyen un grupo de hongos que se les desconoce su estado teleomorfo; son conocidos también como hongos imperfectos, hongos anamórficos o deuteromicetos. Es imposible clasificartaxonómicamente al grupo de los deuteromicetos debido a que se desconoce su estado de reproducción sexual (Moore-Landecker 1996). Los mismos pertenecen a un grupo taxonómico artificial que incluye 15,000 especies distribuidas en tres grupos: Hyphomycetes, Agonomycetes y Coelomycetes. Los hongos que componen el grupo de los Hyphomycetes abundan en el suelo y en ambientes acuáticos, también, tienen elpotencial de convertirse en patógenos de plantas y animales. Dentro del grupo de los Hyphomycetes se encuentran los hongos del género Curvularia, Los mismos se pueden identificar por sus conidióforos bien definidos y simples, pero más aún por la forma peculiar de sus conidias (“boomerang”)

Materiales y Métodos
Preparación del medio de cultivo Agar de Extracto de Malta (MEA)
Se realizaron loscálculos para la preparación del medio de cultivo a ser utilizado para la técnica de exposición de plato. Se utilizaron 33.6 g del medio MEA deshidratado, diluidos en 1000 mL de agua destilada contenida en un matraz. Luego de mezclar por agitación manual, el matraz fue colocado en el microondas para continuar el proceso de homogenización utilizando calor. Al salir del microondas se tapó el matrazcon papel de aluminio y se selló con cinta adhesiva termolábil para pasar a ser esterilizado en el autoclave. Una vez culminado el proceso de esterilización se esperó a que la temperatura del medio fuese 40° C para añadir el ácido láctico y luego se sirvió en platos Petri.

Exposición de Plato
Se expuso el plato Petri que contenía el medio MEA por un periodo de 15 minutos en el balcón de unapartamento ubicado en un tercer piso en el pueblo de Mayagüez. Luego se selló con parafina y se rotuló dejándose a temperatura ambiente hasta observar un crecimiento razonable de colonias de hongos. En ese momento se guardó el plato en la nevera hasta el momento de ser llevado al laboratorio.
Caracterización de Colonia Asignada y Realización de Cultivo Puro
Una colonia del plato que fueexpuesto fue seleccionada como desconocido. Se anotaron las características macroscópicas de esa colonia y luego se extrajo un poco de la colonia del hongo utilizando una aguja en forma de L y un mechero. La muestra fue colocada en un tubo de ensayo con el medio de cultivo PDA (“Potato Dextrose Agar”) para luego ser incubada por un periodo de 7 días.
Preparación de Laminillas Semipermanentes
Seutilizó una laminilla, dos cubre objetos, lactofenol, un mechero, una aguja en forma de L y muestra obtenida de la colonia seleccionada para la preparación de una laminilla semipermanente. Una vez preparada, la laminilla pasó a ser observada bajo un microscopio de luz.
Preparación de Cámara Húmeda
Se preparó una cámara húmeda a partir del cultivo puro del hongo desconocido. Se utilizó un plato decristal estéril que adentro tenía una base de cristal sobre la que se colocó una laminilla con dos pedazos del medio PDA, que fueron inoculados con el hongo desconocido utilizando una aguja en forma de L y cada uno fue cubierto con un cubreobjetos. Al fondo del plato se añadió agua destilada. El plato fue sellado y rotulado para luego ser incubado por un periodo de 7 días. Al paso de los 7 días...