Hongos

Hongos y Levaduras Medio.
Medio destinado al recuento de hongos y levaduras en alimentos.
Fundamento
Este medio fue desarrollado por Mossel y colaboradores y propuesto por la Federación Internacional de Lechería F.I.L.-I.D.F. norma N° 94-1980. Es un medio selectivo para el recuento de levaduras y hongos a partir de una gran variedad de muestras alimenticias. El medio tiene un pH casi neutro,usándose el cloranfenicol como agente selectivo para suprimir el crecimiento bacteriano.
Fórmula (en gramos por litro) | Instrucciones |
  Extracto de levadura | 5.0 | Suspender 40 g del polvo deshidratado en un litro de agua destilada. Homogeneizar la muestra, hervir hasta disolver el agar. Distribuir en recipientes adecuados. esterilizar en autoclave durante 15 minutos a 121°C. |  Glucosa | 20.0 | |
  Cloranfenicol | 0.1 | |
  Agar | 15.0 | |
pH final: 6.6 ± 0.2 |
Siembra
Pipetear por duplicado en placas de Petri estériles, alícuotas de 1 ml de la muestra, a partir de diluciones 10-1, 10-2, etc. Agregar rápidamente a las placas, 12 ml aproximadamente del medio de cultivo fundido y enfriado a 40-45°C. Mezclar las alícuotas con el medio, mediante movimientos de vaivén yrotación.
Incubación
Incubar a temperatura ambiente (20-24 °C), durante 3 a 5 días.

Resultados
Seleccionar las placas que contengan entre 30 y 300 colonias y contar en forma separada los hongos de las levaduras. Multiplicar el número de hongos y el número de levaduras por la inversa de la dilución, y expresarlo como número de hongos y levaduras por gramo o mililitro del producto analizado.Microorganismos | Crecimiento |
Sacharomyces cerevisiae | Bueno |
Aspergillus niger | Bueno |
Staphylococcus aureus | Inhibido |
Escherichia coli | Inhibido |
Características del medio
Medio preparado: ámbar claro.
Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 ºC.
Medio preparado: a 2-8 ºC.

m-Caldo para hongos y levaduras (m-Green yeast and mold broth).
Medio de cultivorecomendado para la investigación de hongos y levaduras en el análisis de rutina de bebidas, por la técnica de filtración por membrana.

Fundamento
El medio de cultivo contiene un alto poder nutritivo, pero el desarrollo bacteriano está inhibido debido al pH ácido. El verde de bromocresol es el indicador de pH que facilita la visualización y el recuento de las colonias de hongos, las cuales son verdesdebido a la difusión del indicador a la colonia (reacción alcalina). Los productos finales del metabolismo microbiano, difunden en el medio, disminuyen el pH y producen un viraje del indicador del color verde al amarillo (reacción ácida).
Fórmula (en gramos por litro) | Instrucciones |
  Extracto de levadura | 9.0 | Suspender 73 g del polvo en un litro de agua destilada. Dejar reposar 5minutos y mezclar hasta uniformar. Una vez disuelto, distribuir y esterilizar en autoclave durante 10 minutos a 118 ºC. |
  Glucosa | 50.0 | |
  Tripteína | 5.0 | |
  Peptona de carne | 5.0 | |
  Sulfato de magnesio | 2.1 | |
  Fosfato monopotásico | 2.0 | |
  Diastasa | 0.05 | |
  Tiamina | 0.05 | |
  Verde de bromocresol | 0.026 | |
pH final: 4.6 ± 0.2 |
Siembra
1-Embeberuna almohadilla estéril en placa de Petri estéril con 2.0-2.5 ml de m-Caldo para hongos y levaduras.
2-Filtrar por membrana la muestra a analizar.
3-Colocar la membrana sobre la almohadilla.

Incubación
Incubar las placas 30-35 ºC, durante 48 horas, en aerobiosis.
Resultados
Las colonias de hongos son verdes y generalmente filamentosas.
Las colonias de levaduras son verdes y opacas.Microorganismos | Crecimiento |
Sacharomyces cerevisiae | Bueno |
Aspergillus niger | Bueno |
Características del medio
Medio preparado: verde claro.
Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 ºC.
Medio preparado: a 2-8 ºC.
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Caldo m-Recuento de Hongos y Levaduras.
Medio de cultivo desarrollado por Schaufus para el recuento de hongos y levaduras en productos azucarados y otras...