Hplc
Páginas: 6 (1442 palabras)
Publicado: 15 de agosto de 2010
CROMATOGRAFIA LIQUIDA DE ALTA PRESIóN
Cromatografía liquida de Alta presión, llamada también Cromatografía Liquida de Alta Perfomance, esta es una técnica de separación basada en una fase estacionaria sólida y en una fase móvil liquida. Las separaciones se logran por partición, absorción o intercambio iónico, dependiendo del tipo de fase estacionaria empleada. La HPLC tiene ventajascaracterísticas sobre la cromatografía de gases para el análisis de compuestos orgánicos. Los compuestos que se van analizar se disuelven en un disolvente adecuado y la mayoría de las separaciones tienen lugar a una temperatura ambiente. Por lo tanto, la mayoría de los fármacos, aun siendo compuestos no volátiles o térmicamente inestables, pueden cromatografiarse sin descomposición o sin necesidad de hacerderivados volátiles.
Un cromatógrafo de líquidos consta de un recipiente que contiene la fase móvil, una bomba para forzar el paso de la fase móvil a través del sistema a alta presión, un inyector para introducir la muestra en la fase móvil, una columna cromatográfica, un detector y un dispositivo de recolección de datos (computadora, un integrador o un registrador).
Los sistemas de bombeode HPLC administran cantidades exactas de fase móvil desde los recipientes hasta la columna mediante unas tuberías y uniones adecuadas para altas presiones.
Las bombas empleadas para el análisis cuantitativo deben construirse con materiales inertes a los componentes corrosivos de la fase móvil y ser capaces de bombear la fase movida a una velocidad constante, con fluctuaciones mínimas, duranteperiodos de tiempo prolongados. Los compuestos que se van a cromatografiar se inyectan en la fase móvil, ya sea manualmente usando jeringas o inyectores de espiral o bien automáticamente mediante el uso de inyectores automáticos.
Los inyectores automáticos pueden programarse para controlar el volumen de muestreo, el número de inyecciones y los ciclos de enjuague del espiral, el intervalo entrelas inyecciones y otras variables operativas. Con presiones mayores, es indispensable utilizar una válvula de inyección. La mayoría de los análisis farmacéuticos, la separación se logra por la partición de los compuestos presentes en la solución de prueba entre la fase móvil y la estacionaria.
Columnas: la separación se logra en la mayoría de los análisis farmacéuticos por la partición decompuestos presentes en la solución de prueba en la fase móvil y estacionaria. Los sistemas:
Fase estacionaria polar (sílice, alumina), fase móvil no polar (hexano, cloroformo….fase normal
Fase estacionaria no polar, fase móvil polar (agua, acetonitrilo, metanol)….fase reversa
La cromatografía de partición casi siempre se usa para compuestos solubles en hidrocarburos de peso molecular menor a1000. La fase móvil más o menos polar es la que controla el tiempo de retención del compuesto y la afinidad a la fase estacionaria. La polarizada de la fase móvil se puede variar agregando n° números de compuestos.
Las fases estacionarias para la moderna cromatografía de líquidos en fase reversa consta de una fase orgánica químicamente unida a sílice u otro material generalmente con un diámetroentre 3um a 10um.
Las fases estacionarias polimétricas recubiertas sobre el soporte son más duraderas.
Las columnas pueden calentarse para proporcionar separaciones mas eficaces, pero rara vez se las utiliza a temperaturas por encima de los 60°C, debido a la potencial degradación de la fase estacionaria o la volatilidad de la fase móvil. A menos que se especifique algo diferente en lamonografía las columnas se emplean a temperatura ambiente.
Cromatografía de intercambio iónico: Se emplea para separar compuestos ionizables y solubles en agua con un peso molecular menor de 1500. Las fases estacionarias son generalmente resinas orgánicas sintéticas; las resinas de intercambio catiónico contienen sitios activos con carga negativa y se emplean para separar sustancias básicas, ej...
Cromatografía liquida de Alta presión, llamada también Cromatografía Liquida de Alta Perfomance, esta es una técnica de separación basada en una fase estacionaria sólida y en una fase móvil liquida. Las separaciones se logran por partición, absorción o intercambio iónico, dependiendo del tipo de fase estacionaria empleada. La HPLC tiene ventajascaracterísticas sobre la cromatografía de gases para el análisis de compuestos orgánicos. Los compuestos que se van analizar se disuelven en un disolvente adecuado y la mayoría de las separaciones tienen lugar a una temperatura ambiente. Por lo tanto, la mayoría de los fármacos, aun siendo compuestos no volátiles o térmicamente inestables, pueden cromatografiarse sin descomposición o sin necesidad de hacerderivados volátiles.
Un cromatógrafo de líquidos consta de un recipiente que contiene la fase móvil, una bomba para forzar el paso de la fase móvil a través del sistema a alta presión, un inyector para introducir la muestra en la fase móvil, una columna cromatográfica, un detector y un dispositivo de recolección de datos (computadora, un integrador o un registrador).
Los sistemas de bombeode HPLC administran cantidades exactas de fase móvil desde los recipientes hasta la columna mediante unas tuberías y uniones adecuadas para altas presiones.
Las bombas empleadas para el análisis cuantitativo deben construirse con materiales inertes a los componentes corrosivos de la fase móvil y ser capaces de bombear la fase movida a una velocidad constante, con fluctuaciones mínimas, duranteperiodos de tiempo prolongados. Los compuestos que se van a cromatografiar se inyectan en la fase móvil, ya sea manualmente usando jeringas o inyectores de espiral o bien automáticamente mediante el uso de inyectores automáticos.
Los inyectores automáticos pueden programarse para controlar el volumen de muestreo, el número de inyecciones y los ciclos de enjuague del espiral, el intervalo entrelas inyecciones y otras variables operativas. Con presiones mayores, es indispensable utilizar una válvula de inyección. La mayoría de los análisis farmacéuticos, la separación se logra por la partición de los compuestos presentes en la solución de prueba entre la fase móvil y la estacionaria.
Columnas: la separación se logra en la mayoría de los análisis farmacéuticos por la partición decompuestos presentes en la solución de prueba en la fase móvil y estacionaria. Los sistemas:
Fase estacionaria polar (sílice, alumina), fase móvil no polar (hexano, cloroformo….fase normal
Fase estacionaria no polar, fase móvil polar (agua, acetonitrilo, metanol)….fase reversa
La cromatografía de partición casi siempre se usa para compuestos solubles en hidrocarburos de peso molecular menor a1000. La fase móvil más o menos polar es la que controla el tiempo de retención del compuesto y la afinidad a la fase estacionaria. La polarizada de la fase móvil se puede variar agregando n° números de compuestos.
Las fases estacionarias para la moderna cromatografía de líquidos en fase reversa consta de una fase orgánica químicamente unida a sílice u otro material generalmente con un diámetroentre 3um a 10um.
Las fases estacionarias polimétricas recubiertas sobre el soporte son más duraderas.
Las columnas pueden calentarse para proporcionar separaciones mas eficaces, pero rara vez se las utiliza a temperaturas por encima de los 60°C, debido a la potencial degradación de la fase estacionaria o la volatilidad de la fase móvil. A menos que se especifique algo diferente en lamonografía las columnas se emplean a temperatura ambiente.
Cromatografía de intercambio iónico: Se emplea para separar compuestos ionizables y solubles en agua con un peso molecular menor de 1500. Las fases estacionarias son generalmente resinas orgánicas sintéticas; las resinas de intercambio catiónico contienen sitios activos con carga negativa y se emplean para separar sustancias básicas, ej...
Leer documento completo
Regístrate para leer el documento completo.