Hplc

Curso de cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC): Prácticas de laboratorio y cuestiones teórico-prácticas. Parte I. Introducción y práctica de laboratorio: cálculo de la eficiencia y representación gráfica de la ecuación de van Deemter
María Estrella Legaz González. Mara Sacristán San Cristóbal. Eva María Díaz Peña. Borja Alarcón Aguareles. Carlos Vicente Córdoba.
Departamento deBiología Vegetal I (Fisiología Vegetal). Facultad de Biología. Universidad Complutense de Madrid. Avenida José Antonio Novais, 2. 28040 Madrid. España. melegaz@bio.ucm.es marasacristan@bio.ucm.es evam.diaz@bio.ucm.es borjaestremera@hotmail.com cvicente@bio.ucm.es

Resumen: En el presente curso de HPLC se plantean tres prácticas de laboratorio, de la más fácil a la más compleja, publicadas en trespartes en las que el alumno trata de resolver los problemas iniciales que cualquier investigador debe plantearse a la hora de realizar un análisis cromatográfico. En la primera práctica: cálculo de la eficiencia y representación gráfica de la ecuación de van Deemter (Parte I), se calcula el flujo de fase móvil óptimo, coincidente con la menor altura equivalente de plato teórico. En la segundapráctica: análisis cuantitativo básico (Parte II), se estudia la respuesta del detector en función de la masa de analito inyectada. La obtención de ecuaciones, por regresión lineal, permite el cálculo de masas desconocidas de analitos inyectados cuando se interpola en las mismas. La tercera práctica: optimización en la separación de compuestos semejantes mediante modificación de la fase móvil (ParteIII), trata de resolver la separación de una muestra patrón de seis substancias, de naturaleza semejante, en sus componentes individuales. Para ello se realizan separaciones con fases móviles isocráticas o en gradiente. El curso se completa con una serie de cuestiones teórico-prácticas (Parte IV), elaboradas a partir de separaciones reales en las que el alumno debe discutir las posibles respuestas alas preguntas que se formulan. Palabras clave: Fase estacionaria. Fase móvil. Columna analítica. Analito. HPLC. Eficiencia. Platos teóricos. Tiempo de retención. Masa inyectada. Análisis en gradiente. Análisis isocrático.

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Reduca (Biología). Serie Técnicas y Métodos. 4 (3): 1-32, 2011.
ISSN: 1989-3620

PRESENTACIÓN El origen y la base de este curso fue la asignatura que la Prof. Legazimpartió como curso de Doctorado en la Facultad de Biología de la UCM bajo el título de “Fitoquímica Experimental”, después denominada “Análisis Fitoquímico: Cromatografía y Técnicas Afines”, con una duración de 75h, desde 1983 a 2006, veintitrés años consecutivos. Con las ampliaciones y adaptaciones necesarias para la finalidad que perseguía, la Prof. Legaz impartió el curso de “Especializaciónde Instrumentación en Tecnología Ambiental: Cromatografía de Gases y Líquidos y Espectrometría de masas”, durante 5 años académicos, con una duración de 90h, en el Instituto Universitario de Ciencias Ambientales (IUCA) de la Universidad Complutense de Madrid, desde 1986 a 1991. Cuando este Centro estableció su Master Universitario bianual en Ciencias Ambientales, pionero de los MastersComplutenses, este mismo curso fue impartido entre 1992 y 1994. A requerimiento de diferentes Universidades Iberoamericanas, se hicieron modificaciones del curso, de acuerdo con las necesidades de cada Centro y fue impartido: En la Universidad de La Habana (Cuba) en Junio de 1988, con el título de “I Curso de Postgrado "Cromatografía de Gases y Líquidos”. En la Universidad de La Habana (Cuba) en Octubre de1989, con el título de “IV Curso Internacional de Postgrado: Curso Teórico-Práctico sobre Cromatografía Líquida de Alta Resolución", en colaboración con el Instituto de Investigaciones Nucleares. En la Universidade Federal da Paraiba (Pb, Brasil) en Mayo de 1988, con el título de “II Curso de Postgrado "Curso Internacional do Cromatografía Líquida de Alta Pressao (HPLC)", aprobado por el Conselho...