Identificación de Bacilos Gram negativos

IDENTIFICACION DE BACILOS GRAM – NEGATIVOS
ENTEROBACTERIAS
INTRODUCCION
Las Enterobacterias son bacterias Gram negativas que pueden tener morfología de bacilos o cocos, aunque en su mayoría son bacilos o cocobacilos. Los bacilos gramnegativos pertenecientes a Enterobacteriaciae son las bacterias que se recuperan con mayor frecuencia en las muestrasclínicas. Ampliamente dispersos en la naturaleza, estos microorganismos se encuentran en la tierra y el agua, sobre las plantas y, como lo indica el nombre de la familia, en el tubo digestivo de seres humanos y animales (1). Estos bacilos Gram negativos no son exigentes y son de fácil cultivo, anaerobios facultativos, son oxidasa negativo (es decir carecende la enzima citocromo oxidasa) y catalasa positivo, son capaces de reducir nitrato en nitrito, son fermentadores de carbohidratos en condiciones anaeróbicas con o sin la producción de gas (en especial glucosa y lactosa), y oxidadores de una amplia gama de substratos en condiciones aeróbicas. Muchos géneros tienen un flagelo que sirve para desplazarse,aunque algunos no son móviles. Adicionalmente , las Enterobacterias no forman esporas, algunas producen toxinas y pueden ser encapsuladas (2). La morfología característica de las colonias en los casos típicos de algunos miembros de Enterobacteriaceae son relativamente grandes, gris mate, secas o mucoides en agar sangre, la hemolisis en este medio esvariable y no es característica. La diferenciación de las enterobacterias se basa principalmente en la presencia o ausencia de diferentes enzimas las cuales puede dirigir el metabolismo de las bacterias a lo largo de una de varias vías que pueden detectarse mediante medios especiales utilizados en técnicas de cultivo in vitro, si bien es posible unaidentificación preliminar de las enterobacterias sobre la base de las características de las colonias y las reacciones bioquímicas en los medios de aislamiento primario, una identificación mejor de las especies requiere la determinación de características fenotípicas adicionales que reflejen el código y la identidad del microrganismo a evaluar (3). Espor ello que el principal objetivo al identificar una muestra es el reconocer las características morfológicas y metabólicas de estos bacilos Gram negativos fermentadores y no fermentadores de glucosa, implementando un correcto procedimiento para su recuperación e identificación por medio de pruebas bioquímicas estándar.

MATERIALES Y METODOS
Pararealizar la práctica de laboratorio fueron empleados los siguientes materiales, entregados por la monitora y la directora del curso:
1. Un cultivo en medio sólido (agar Tripticasa de Soya) sembrado con un bacilo Gram – negativo (Caja 1).
2. Laminas (a cargo del estudiante) y colorantes para Tinción Gram (cristal violeta, lugol, alcohol acetona y fucsina básica)
Metodología: Serealizó tinción Gram del cultivo asignado elaborando un frotis a partir de una colonia aislada.
3. Dos tubos prueba Glucosa OF (caldo con glucosa al 1%).
Prueba Glucosa OF, El metabolismo de un glúcido puede seguir la vía oxidativa o fermentativa. En vía oxidativa el aceptor final de electrones debe ser el oxígeno y por consiguiente el proceso esaerobio y produce poca acidez, mientras que en vía fermentativa el aceptor final de electrones es un compuesto orgánico y el proceso es anaerobio, originando mucha acidez en poco tiempo. La fermentación u oxidación del glúcido se puede ver en dos tubos con medio de cultivo glucosado, uno abierto (aerobio) y otro cerrado con parafina (anaerobio).
Se...