Identificación de HACEK aislados clínicos mediante sistema de espectrometría de masas con analizador de tiempo de vuelo y desorción mediante láser asistida por matriz (MALDI-TOF)





Universidad Santo Tomas
Carrera de Tecnología Médica, Sede Viña del mar
Mención Laboratorio Clínico, Hematología y Banco de Sangre

Identificación de HACEK aislados clínicos mediante sistema de espectrometría de masas con analizador de tiempo de vuelo y desorción mediante láser asistida por matriz (MALDI-TOF)

Seminario de Laboratorio
Microbiología clínicaRocío Tapia Sepúlveda

Profesora: T.M Fabiola Barra

Viña del mar – Chile
2013

ÍNDICE








INTRODUCCIÓN
La identificación de microorganismos en el laboratorio de microbiología se ha llevado a cabo tradicionalmente mediante pruebas fenotípicas como son la caracterización macroscópica de las colonias, características tintoriales y pruebas bioquímicas. Un avance importante fue laautomatización de estas pruebas permitiendo un diagnóstico más rápido. Sin embargo, a pesar de los avances, estas tecnologías aún requieren de tiempos de incubación que pueden tomar varias horas y con un alto costo asociado. Por otro lado, la espectrometría de masas, utilizada ampliamente en el campo de la investigación, a pesar de su alta especificidad, ha tenido un rol menor en el laboratorioclínico.
El desarrollo de la tecnología de MALDI-TOF MS (matrix assisted laser desorption ionization-time of flight-mass spectrometry, en español: desorción láser asistida por la matriz con detección de masas por tiempo de vuelo MALDI-TOF MS) hace más de 30 años ha permitido la utilización de la espectrometría de masas en el diagnóstico microbiológico de rutina. Permite la identificación demicroorganismos mediante el análisis de proteínas, principalmente ribosomales, a partir de colonias o directamente de muestras a través de la creación de un espectro de masas el que es específico para cada especie. La implementación de MALDI-TOF MS es sencilla, necesitando sólo un par de días para la capacitación del personal, la identificación es rápida y el costo por cada muestra es inferior al costo deotros métodos diagnósticos.
El número de publicaciones con respecto al desempeño de MALDI-TOF MS en la identificación de microorganismos ha ido aumentando de manera importante. Esta tecnología ha demostrado ser confiable, específica y rápida para la identificación de distintas bacterias aeróbicas y anaeróbicas. Los estudios abarcan bacterias de distintas familiascomo: Enterobacteriaceae, bacilos gramnegativos no fermentadores, cocáceas grampositivas, levaduras y micobacterias. Este método ha sido utilizado ampliamente en laboratorios clínicos europeos.
El objetivo de este trabajo fue evaluar la utilidad y el desempeño de MALDI-TOF MS en la identificación de 103 aislados clínicos del grupo HACEK (Haemophilus parainfluenzae , Aggregatibacter aphrophilus ,Aggregatibacteractinomycetemcomitans, Cardiobacterium hominis, Eikenella corrodens, y Kingella kingae ) y 20 aislados clínicos de Haemophilus influenzae, en donde el 93% de los microorganismos HACEK fueron identificados correctamente usando la base de datos Bruker (proveedor de MALDI –TOF), y el 100% fue identificado utilizando una base de datos personalizada que incluía los aislados clínicos.

OBJETIVOS
Evaluar el desempeñode MALDI-TOF para la identificación de aislados clínicos del grupo HACEK y Haemophilus influenzae.

MARCO TEÓRICO
Laboratorios de microbiología clínica se esfuerzan por identificar los organismos infecciosos de las muestras de pacientes de la forma más precisa a un tiempo y costo lo más eficiente posible. Este proceso puede ser obstaculizado por organismos raros o difíciles de identificartales como los del grupo HACEK (Haemophilus Parainfluenzae, Aggregatibacter aphrophilus, actinomycetemcomitans Aggregatibacter, Cardiobacterium hominis, Eikenella corrodens y Kingella kingae).

Características del grupo HACEK
Son fastidiosos bacilos Gram-negativos, los cuales habitan la cavidad oral del hombre y animales
Pueden causar endocarditis, especialmente en niños pequeños y pacientes...