identificación de microorganismos

identificacion de microorganismos

IDENTIFICACION DE MICROORGANISMOS
Se entiende por identificación microbiana al conjunto de técnicas y procedimientos que se aplican para establecer la identidad de un microorganismo.
METODOS MAS UTILIZADOS PARA LA IDENTIFICACION DE MICROORGANISMOS
• Métodos basados en criterios morfológicos.
• Métodos basados en tinción diferencial.
• Métodos basados enpruebas bioquímicas.
• Métodos basados en tipificación con fagos.
• Métodos basados en pruebas serológicas.
• Métodos basados en detección molecular.
METODO BASADO EN CRITERIOS MORFOLÓGICOS
• Los rasgos morfológicos (estructurales) han ayudado a los taxonomistas a clasificar organismos.
• Bajo el microscopio pueden ser tan parecidos dificultándose su clasificación, aún cuando la morfologíacelular dice poco sobre las relaciones filogenéticas, sigue siendo útil para la identificación bacteriana.
• Características macroscópicas, en función del tamaño, altura de la colonia, forma, color, olor, textura y grado de adherencia al medio de cultivo.
• Por ejemplo: la presencia de endosporas y su localización resulta de mucha utilidad para la identificación de bacilos esporulados.Métodos basados en tinción diferencial.
• Es posible sacar conclusiones en relación con la morfología examinando una lamina que fue sometida a un proceso de tinción.
• Estos criterios morfológicos encabezan la primera etapa del proceso de identificación la mayor parte de la bacterias teñidas con Gram se pueden clasificar como Gram positivas y Gram negativas.
• Tinciones fluorescentes (naranja deacridina, rodamina, blanco calcofluor) tinción de inmunofluorescencia directa o indirecta.
• Tinciones vitales para la visualización de espiroquetas y protozoos.
• Tinciones acidorresistentes y otras tinciones para detectar capsulas, flagelos, esporas…
Métodos basados en pruebas bioquímicas.
• Estas pruebas se fundamentan en demostrar si el organismo es capaz de fermentar azúcares, la presenciade enzimas, la degradación de compuestos, la producción de compuestos coloreados.
• Aun bacterias fuertemente relacionadas pueden separase en dos especies diferentes con base a pruebas bioquímicas.
• Esta familia Enterobacteriaceae incluye a varios patógenos que causan sindromes diarreicos.
• Los géneros clinicamente más importantes son: Escherichia, Salmonella, Shigella, Citrobacter yEnterobacter.


Métodos basados en tipificación con fagos.
• La interacción entre un virus bacteriano (fago) y su célula bacteriana sensible es sumamente específica.
• Proceso de adsorción se encuentra mediado por receptores específicos tanto en el virus como en la célula bacteriana.
• A una placa con medio de cultivo sólido inoculado con un cultivo puro de una determinada bacteria, se le añade unaalícuota de un fago específico; ocasionando la lisis de las bacterias.
• La evidencia en el cultivo como zonas claras definidas, denominadas placas, que indican que hubo infección y lisis celular.
• El uso de fagos específicos permite identificar y subclasificar bacterias dentro de una misma especie.
Métodos basados en pruebas serológicas.
• Implican la utilización de preparaciones deinmunoglobulinas específicas provenientes de suero o de un reactivo y que pueden ser de gran utilidad en la identificación microbiana en muestras puras o muestras biológicas.
• Cada uno tiene un fundamento particular, pero en líneas generales todos se basan en la reacción de un antígeno presente en el agente microbiano con su anticuerpo correspondiente.
• Los serotipos permiten diferenciar organismos anivel de subespecie, algo de gran importancia en epidemiología.
Métodos basados en detección molecular.
• A través de procedimientos y reactivos, se pueden detectar determinadas secuencias de ADN que son propias de un determinado agente microbiano.
• PCR (Polymerase Chain Reaction) se aplica generalmente para la identificación de organismos que no pueden ser cultivados por métodos...