Identificaci n del Bacilo de Koch
Páginas: 5 (1097 palabras)
Publicado: 3 de mayo de 2015
Identificación del
Bacilo de Koch
ALUMNO: LARA ROMERO DIEGO ALONSO
PROFESORA: MS.C. BIOLOGA MARÍA TERESA VALDERRAMA ROJAS
INTRODUCCION
Se estima que alrededor de un tercio de la población mundial
están infectadas con Mycobacterium tuberculosis, bacilo
causante de la tuberculosis; aproximadamente 8 millones de
ellos enferman anualmente y cerca de dos millones mueren por
la enfermedad, aúncuando se cuenta con técnicas de
diagnóstico sencillas, precisas y con tratamientos eficaces.
OBJETIVOS
Determinar el tipo de coloración para la identificación del bacilo
de koch en una muestra de esputo
Aplicar los conceptos de la Baciloscopia
MATERIALES Y METODO
METODO:ZIEHL NEELSEN
MATERIALES
Dos varillas de vidrio
Pinzas
Porta objetos
pañuelos o trozos de papelsuave.
el Registro del Laboratorio.
una lapicero.
una caja para guardar portaobjetos.
Hisopo
Muestra : Esputo
Equipos:
Mechero
Microscopio
INSUMOS
Decolorante para Ziehl Neelsen: solución de
alcohol ácido
Azul de metileno
fucsina fenicada
Alcohol
Agua
aceite de inmersión.
un frasco con etanol a 70%.
PROCEDIMIENTO
Coloración:
ü Disponer dos varillas de vidrio en forma paralela, a unadistancia de aproximadamente 5
cm entre una y otra, una sobre un soporte dentro del lavabo/pileta de coloración.
ü Filtrar la cantidad de fucsina necesaria para las tinciones a realizar en la jornada. Si el número
de baciloscopia a colorear es pequeño, se puede filtrar la fucsina directamente cuando se la
deposita sobre el extendido a través de un pequeño embudo con papel de filtro.
ü Colocarsobre el soporte las láminas fijadas conservando el orden numérico con el extendido
hacia arriba y manteniendo una separación de al menos 1cm entre ellas.
ü Cubrir totalmente la superficie del extendido con fucsina básica fenicada recién filtrada.
Dispensar el colorante con suavidad, sin salpicar y sin tocar con el gotero o con el embudo los
extendidos.
ü Con la llama de un hisopo embebido enalcohol calentar suavemente por debajo de los
extendidos, con movimientos de vaivén, hasta que observe que se desprenden los primeros
En caso de derrame del colorante, reponer la fucsina, no dejar secar el preparado.
ü En el término de aproximadamente cinco minutos calentar tres veces hasta emisión
de vapores; esto es suficiente para que la fucsina penetre adecuadamente en el bacilo
yse fije a sus lípidos. No hervir la fucsina porque la pared de los bacilos puede
destruirse y colorearse mal.
ü Con una pinza, levantar cuidadosamente la lámina portaobjetos desde el extremo
más cercano al operador. Enjuagar con abundante agua a baja presión, con un frasco
o un grifo. Lavar muy suave y cuidadosamente la superficie eliminando totalmente la
solución de fucsina. Girar elextendido y lavar con cuidado también la parte posterior.
ü Inclinar el portaobjetos para eliminar el exceso de agua y así evitar diluir los
reactivos que se utilizarán a continuación.
Decoloración:
ü Cubrir la totalidad del extendido con solución
decolorante y dejar actuar aproximadamente 3
minutos.
ü Enjuagar con abundante agua a baja presión.
ü Verificar que el extendido se ha decolorado(las
partes más gruesas del extendido a lo sumo
conservan un leve tinte rosado). Si se observan
cúmulos rojos o coloración rosada intensa, volver
a cubrir con solución decolorante, dejarla actuar
entre uno y tres minutos y enjuagar nuevamente.
ü Eliminar el exceso de agua inclinando el
portaobjetos
Coloración de fondo:
• Cubrir todo el extendido con solución de azul de
metileno.
• Dejaractuar durante un minuto.
• Enjuagar las láminas en ambas caras con agua a baja
presión y limpiar parte inferior con un algodón si ha
quedado coloreada.
• Observar si las láminas conservan la numeración clara
y visible. Si no es así volver a numerarlas.
• Dejar secar las láminas a temperatura ambiente,
apoyándolas en posición vertical en un soporte sobre
un papel absorbente. No apoyar papel...
Bacilo de Koch
ALUMNO: LARA ROMERO DIEGO ALONSO
PROFESORA: MS.C. BIOLOGA MARÍA TERESA VALDERRAMA ROJAS
INTRODUCCION
Se estima que alrededor de un tercio de la población mundial
están infectadas con Mycobacterium tuberculosis, bacilo
causante de la tuberculosis; aproximadamente 8 millones de
ellos enferman anualmente y cerca de dos millones mueren por
la enfermedad, aúncuando se cuenta con técnicas de
diagnóstico sencillas, precisas y con tratamientos eficaces.
OBJETIVOS
Determinar el tipo de coloración para la identificación del bacilo
de koch en una muestra de esputo
Aplicar los conceptos de la Baciloscopia
MATERIALES Y METODO
METODO:ZIEHL NEELSEN
MATERIALES
Dos varillas de vidrio
Pinzas
Porta objetos
pañuelos o trozos de papelsuave.
el Registro del Laboratorio.
una lapicero.
una caja para guardar portaobjetos.
Hisopo
Muestra : Esputo
Equipos:
Mechero
Microscopio
INSUMOS
Decolorante para Ziehl Neelsen: solución de
alcohol ácido
Azul de metileno
fucsina fenicada
Alcohol
Agua
aceite de inmersión.
un frasco con etanol a 70%.
PROCEDIMIENTO
Coloración:
ü Disponer dos varillas de vidrio en forma paralela, a unadistancia de aproximadamente 5
cm entre una y otra, una sobre un soporte dentro del lavabo/pileta de coloración.
ü Filtrar la cantidad de fucsina necesaria para las tinciones a realizar en la jornada. Si el número
de baciloscopia a colorear es pequeño, se puede filtrar la fucsina directamente cuando se la
deposita sobre el extendido a través de un pequeño embudo con papel de filtro.
ü Colocarsobre el soporte las láminas fijadas conservando el orden numérico con el extendido
hacia arriba y manteniendo una separación de al menos 1cm entre ellas.
ü Cubrir totalmente la superficie del extendido con fucsina básica fenicada recién filtrada.
Dispensar el colorante con suavidad, sin salpicar y sin tocar con el gotero o con el embudo los
extendidos.
ü Con la llama de un hisopo embebido enalcohol calentar suavemente por debajo de los
extendidos, con movimientos de vaivén, hasta que observe que se desprenden los primeros
En caso de derrame del colorante, reponer la fucsina, no dejar secar el preparado.
ü En el término de aproximadamente cinco minutos calentar tres veces hasta emisión
de vapores; esto es suficiente para que la fucsina penetre adecuadamente en el bacilo
yse fije a sus lípidos. No hervir la fucsina porque la pared de los bacilos puede
destruirse y colorearse mal.
ü Con una pinza, levantar cuidadosamente la lámina portaobjetos desde el extremo
más cercano al operador. Enjuagar con abundante agua a baja presión, con un frasco
o un grifo. Lavar muy suave y cuidadosamente la superficie eliminando totalmente la
solución de fucsina. Girar elextendido y lavar con cuidado también la parte posterior.
ü Inclinar el portaobjetos para eliminar el exceso de agua y así evitar diluir los
reactivos que se utilizarán a continuación.
Decoloración:
ü Cubrir la totalidad del extendido con solución
decolorante y dejar actuar aproximadamente 3
minutos.
ü Enjuagar con abundante agua a baja presión.
ü Verificar que el extendido se ha decolorado(las
partes más gruesas del extendido a lo sumo
conservan un leve tinte rosado). Si se observan
cúmulos rojos o coloración rosada intensa, volver
a cubrir con solución decolorante, dejarla actuar
entre uno y tres minutos y enjuagar nuevamente.
ü Eliminar el exceso de agua inclinando el
portaobjetos
Coloración de fondo:
• Cubrir todo el extendido con solución de azul de
metileno.
• Dejaractuar durante un minuto.
• Enjuagar las láminas en ambas caras con agua a baja
presión y limpiar parte inferior con un algodón si ha
quedado coloreada.
• Observar si las láminas conservan la numeración clara
y visible. Si no es así volver a numerarlas.
• Dejar secar las láminas a temperatura ambiente,
apoyándolas en posición vertical en un soporte sobre
un papel absorbente. No apoyar papel...
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