Identificacion de bacterias: api 20e
Kristina J. Rivera, Zorely B. Arvelo
Secc. 105
Extracto
Existen varios métodos para la identificación de un microorganismo desconocido. Entre estos métodos se encuentra el Api20E, que es un sistema donde se pueden realizar múltiples pruebas bioquímicas simultáneamente para diferenciar entre especies de la familia Enterobacteriaceae, loque hace a este método uno rápido y efectivo. Como resultado de las pruebas bioquímicas realizadas identificamos a M.morganii cuyo número del Analitycal Profile Index fue 0174000. Este microorganismo es parte de la microbiota normal y es un patógeno oportunista.
Introducción
La familia de las enterobacterias se definen por ser bacterias gram-negativas en forma de bacilos,anaerobiosfacultativos, ermentadores de lactosa, no formadores de esporas y que carecen de motilidad aunque en algunos casos, son móviles mediante flagelos peritricos (se proyectan en todas las direcciones). También se caracterizan por reducir nitrato a nitrito y son negativos a la prueba de oxidasa. Estas bacterias son patógenos oportunistas. Los organismos más comunes entre ellas son Escherichia, Klebsiella,Serratia, Enterobacter, Citrobacter, Proteus, Morganella y Providencia. Estos microorganismos pueden causar infecciones extraintestinales, infecciones urinarias, sepsis, meningitis, abscesos, neumonías, otitis, sinusitis, meningitis, etc.
Existen varios métodos para identificar el género de un microorganismo, dependiendo de la familia a la que pertenece. En nuestro caso particular el propósito deeste trabajo consiste en determinar la identidad de una enterobacteria desconocida. Para cumplir con este propósito se utiliza el método de identificación API20E donde se
realizan las pruebas bioquímicas de manera rápida ya que se pueden realizar múltiples pruebas simultáneamente. Las pruebas bioquímicas consisten en llevar a cabo ciertas pruebas para detectar enzimas o mecanismos metabólicosparticulares que permitan diferenciar entre especies.
Varias generalidades del método de API20E que son importantes de conocer es que este método se utiliza específicamente para identificar bacterias entéricas gram-negativas y se basa en una serie de 20 pruebas. Cada cúpula de la tira del API20E contiene un sustrato deshidratado, por lo cual se tiene que aplicar una suspensión salina luego de serinoculada con la cepa para poder llevar a cabo las pruebas. Si las pruebas son negativas se le asigna un valor de cero mientras que si es positivo se aplica el valor correspondiente a la prueba. La suma de los valores pertinentes para cada prueba por cada tres cúpulas va a producir un número de siete dígitos. Este número es el que nos indica cual es el género del microorganismo luego de serencontrado en el Analitycal Profile Index.
Las pruebas presentes en el API20E Se podrían clasificar mayormente en tres tipos de pruebas; las aerobias (CIT, VP, GEL), anaerobias (ADH, LDC, ODC, H2S, URE) y las de fermentación/oxidación de azucares (GLUcosa, MANitol, NOsitol, SORbitol, RHAmnosa, SACarosa, MELibiosa, AMYgdalin, ARAbinosa) y la prueba de Oxidasa. La prueba de CIT, es para determinar lautilización de citrato como fuente de carbono. Voges-Proskauer (VP), es para determinar la producción de acetoina como producto intermediario de 2,3-butandiol. GEL, es para detectar la enzima de gelatinaza. ADH, LDC y ODC son para detectar las enzimas de Arginina Dihidrolasa, Lisina de Carboxilasa y Ornitina de descarboxilasa respectivamente. H2S, ese utiliza para detectar su producción y la UREpara detectar la enzima de ureasa encargada de degradar la urea. La TDA es para detectar la presencia de Triptofano deAminasa y la prueba de IND es para detectar la producción de indol. Luego de realizar estas pruebas y de haberse incubado, si la prueba de GLUcosa y tres pruebas más resultan ser positivas se procede a añadir a las cúpulas de TDA,IND Y VP los reactivos pertinentes para completar el...
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