Identificacion De Bacterias
Páginas: 5 (1054 palabras)
Publicado: 25 de noviembre de 2012
“PRUEBAS DE SUSCEPTIBILIDAD”
Laboratorio de Microbiología
20 de noviembre de 2012.
INTRODUCCION
Hoy en día, dentro del campo de la medicina, es de vital importancia saber diagnosticar patologías causadas por los microorganismos que hay en el ambiente. El medico actual tienen el deber de saber la teoría y la práctica de cómo es que se deben hacer las distintas pruebas de diagnósticopara la detección y el tratamiento de diversos padecimientos.
Para poder hacer el diagnóstico, existe un gran número de pruebas que se realizan en el laboratorio, que pueden ser bioquímicas, moleculares, serológicas, entre otras. De todas estas se necesita que se analicen organismos viables, que se tomen muestras adecuadas y que este bien inoculadas en medios de cultivo adecuados para que sepermita el crecimiento de los patógenos más adecuados.
Otra cosa importante es saber realizar estudios de susceptibilidad, los cuales están indicados para cualquier microorganismo implicado en un proceso infeccioso, en el que se justifica terapia antimicrobiana. Cuando el germen puede ser resistente a los antimicrobianos usados habitualmente, la actividad antimicrobiana se valora con pruebasde inhibición de crecimiento con discos de antibióticos, pruebas bioquímicas, entre otras cosas.
Las pruebas de susceptibilidad que se utilizan se basan en la concentración del inoculo con el estándar de MacFarland, el cual tiene 1.5x10 8 UFC/ ml y la cepa que debe ser pura.
OBJETIVOS
Los principales objetivos de esta práctica son:
* Aprender los diferentes métodos de susceptibilidaden bacterias
* Aprender a interpretar las pruebas de susceptibilidad
* Identificar por diferentes métodos la muestra dada en el laboratorio.
METODOLOGIA Y RESULTADOS
Para esta práctica, se utilizaron varias pruebas de detección. Estas son:
* Tinción de Gram
* Pruebas en medios de cultivo
* Prueba de lactasa
* Prueba de oxidasa
* Prueba de Indol rápido
Setienen dos cultivos con la misma bacteria, la cual desconocemos, uno en medio de Agar en Sangre y otro de McConkey, se toma una muestra de cada uno y se tiñen con tinción de Gram.
Para determinar por Gram, se tienen que hacer una serie de pasos, con los siguientes reactivos:
* Cristal violeta
* Lugol
* Alcohol/acetona
* Safranina
Figura 1. 1 Pasos y reactivos de la tinción de GramFigura 1. 1 Pasos y reactivos de la tinción de Gram
Esta tinción “se utiliza tanto para poder referirse a la morfología celular bacteriana como para poder realizar una primera aproximación a la diferenciación bacteriana, considerándose Bacteria Gram positiva a las bacterias que se visualizan de color moradas y Bacteria Gram negativa a las que se visualizan de color rosa o rojo o grosella”Una vez realizados estos pasos, mostrados en la figura 1.1, se llevaron las muestras en portaobjetos al microscopio y se observó con un aumento de 100x con ayuda de aceite de inmersión.
Figura 1. 2 Algoritmo para la prueba de la lactasa
Figura 1. 2 Algoritmo para la prueba de la lactasa
En agar en sangre su pudieron observar bacilos gram negativos. En McConkey se confirma que es gram negativoy lactasa positivo. La prueba de la lactasa “se usa para diferenciar entre las enterobacterias en general y el grupo de las coliformes.”
Como se observa en la figura 1.3, dentro del grupo de los Gram negativos hay una amplia variedad, por lo que hay que realizar otra serie de pruebas, como lo son la prueba de la catalasa, de lactasa, de oxidasa, etc.
Figura 1. 3 Clasificación demicroorganismos por tinción de Gram y otras pruebas.
Para saber con más especificidad a que familia de patógenos pertenece nuestra muestra, se realizaron las pruebas de oxidasa e indol rápido. Para la prueba de oxidasa se tomó una muestra de Agar en sangre con un aplicador de madera y se colocó en un papel filtro. Después se le agregó una gota de tetrametil-p-fenilendiamino, después de lo cual la...
Laboratorio de Microbiología
20 de noviembre de 2012.
INTRODUCCION
Hoy en día, dentro del campo de la medicina, es de vital importancia saber diagnosticar patologías causadas por los microorganismos que hay en el ambiente. El medico actual tienen el deber de saber la teoría y la práctica de cómo es que se deben hacer las distintas pruebas de diagnósticopara la detección y el tratamiento de diversos padecimientos.
Para poder hacer el diagnóstico, existe un gran número de pruebas que se realizan en el laboratorio, que pueden ser bioquímicas, moleculares, serológicas, entre otras. De todas estas se necesita que se analicen organismos viables, que se tomen muestras adecuadas y que este bien inoculadas en medios de cultivo adecuados para que sepermita el crecimiento de los patógenos más adecuados.
Otra cosa importante es saber realizar estudios de susceptibilidad, los cuales están indicados para cualquier microorganismo implicado en un proceso infeccioso, en el que se justifica terapia antimicrobiana. Cuando el germen puede ser resistente a los antimicrobianos usados habitualmente, la actividad antimicrobiana se valora con pruebasde inhibición de crecimiento con discos de antibióticos, pruebas bioquímicas, entre otras cosas.
Las pruebas de susceptibilidad que se utilizan se basan en la concentración del inoculo con el estándar de MacFarland, el cual tiene 1.5x10 8 UFC/ ml y la cepa que debe ser pura.
OBJETIVOS
Los principales objetivos de esta práctica son:
* Aprender los diferentes métodos de susceptibilidaden bacterias
* Aprender a interpretar las pruebas de susceptibilidad
* Identificar por diferentes métodos la muestra dada en el laboratorio.
METODOLOGIA Y RESULTADOS
Para esta práctica, se utilizaron varias pruebas de detección. Estas son:
* Tinción de Gram
* Pruebas en medios de cultivo
* Prueba de lactasa
* Prueba de oxidasa
* Prueba de Indol rápido
Setienen dos cultivos con la misma bacteria, la cual desconocemos, uno en medio de Agar en Sangre y otro de McConkey, se toma una muestra de cada uno y se tiñen con tinción de Gram.
Para determinar por Gram, se tienen que hacer una serie de pasos, con los siguientes reactivos:
* Cristal violeta
* Lugol
* Alcohol/acetona
* Safranina
Figura 1. 1 Pasos y reactivos de la tinción de GramFigura 1. 1 Pasos y reactivos de la tinción de Gram
Esta tinción “se utiliza tanto para poder referirse a la morfología celular bacteriana como para poder realizar una primera aproximación a la diferenciación bacteriana, considerándose Bacteria Gram positiva a las bacterias que se visualizan de color moradas y Bacteria Gram negativa a las que se visualizan de color rosa o rojo o grosella”Una vez realizados estos pasos, mostrados en la figura 1.1, se llevaron las muestras en portaobjetos al microscopio y se observó con un aumento de 100x con ayuda de aceite de inmersión.
Figura 1. 2 Algoritmo para la prueba de la lactasa
Figura 1. 2 Algoritmo para la prueba de la lactasa
En agar en sangre su pudieron observar bacilos gram negativos. En McConkey se confirma que es gram negativoy lactasa positivo. La prueba de la lactasa “se usa para diferenciar entre las enterobacterias en general y el grupo de las coliformes.”
Como se observa en la figura 1.3, dentro del grupo de los Gram negativos hay una amplia variedad, por lo que hay que realizar otra serie de pruebas, como lo son la prueba de la catalasa, de lactasa, de oxidasa, etc.
Figura 1. 3 Clasificación demicroorganismos por tinción de Gram y otras pruebas.
Para saber con más especificidad a que familia de patógenos pertenece nuestra muestra, se realizaron las pruebas de oxidasa e indol rápido. Para la prueba de oxidasa se tomó una muestra de Agar en sangre con un aplicador de madera y se colocó en un papel filtro. Después se le agregó una gota de tetrametil-p-fenilendiamino, después de lo cual la...
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