Identificacion De Staphilococus Aureus

PRÁCTICA 9.
AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE Staphylococcus aureus PRESENTE EN LECHE VACA Y GARGANTA.

OBJETIVO.- El alumno aislará e identificará bacterias presentes en muestras de la cavidad nasofaríngea y de garganta, así como de leche de vaca enferma de mastitis.

INTRODUCCIÓN.
Las personas y animales con enfermedades infecciosas pueden presentar una variedad de signos y síntomas,algunos evidentes y fáciles de reconocer y otros oscuros y desorientadores.
El enrojecimiento difuso e hinchazón de garganta, las secreciones serosas o purulentas de heridas o membranas mucosas, y la acumulación de pus en abscesos o cavidades orgánicas, que producen a menudo dolor, tumefacción y aumento de color en el área, son signos directos de infección que se requiere un cultivo inmediato a finde establecer el organismo causante, de modo que se pueda iniciar la terapia apropiada.
La correcta recolección de una muestra para su cultivo es posiblemente la etapa más importante en el aislamiento de microorganismos responsables de enfermedades infecciosas. Una muestra deficientemente recogida puede ser el motivo del fracaso de aislar el microorganismo causante y la recuperación decontaminantes puede conducir a una terapia incorrecta o aun perjudicial.
Son varios los conceptos básicos para la correcta recolección de muestras:
1.- La muestra para cultivo debe ser material del verdadero sitio de infección y debe recogerse con un mínimo de contaminación de tejidos, órganos o secreciones adyacentes.
2.- Se debe establecer períodos óptimos para la recolección de muestras a fin de tenerla mejor oportunidad de aislar los microorganismos causantes.
3.- Obtener suficiente cantidad de muestra para llevar acabo las técnicas de cultivo solicitadas.
4.- Utilizar dispositivos de recolección, recipientes para las muestras y medios de cultivo adecuados para asegurar el óptimo aislamiento de microorganismos.
5.- Siempre que sea posible, obtener las muestras antes de la administraciónde antibióticos.
6.- El envase recolector de la muestra debe estar correctamente rotulado.
La flora microbiana usual de garganta, faringe y nariz consiste en estreptococos α- Hemolíticos, especies de Nisseria, Staphylococcus epidermidis, S. aureus, S. pneumoniae, varias espécies de Haemophilus difteroides y numerosas especies de bacterias anaerobias.
La mastitis es una enfermedad demamíferos que causa la inflamación de la glándula mamaria. Puede ser causada por S. aureus, Mycobacterium, Arenobacterium, entre otros.
En la mayoría de los casos las muestras de la garganta y leche de vaca se recogen con la finalidad de aislar estreptococos β-hemolíticos de los grupos A y B.

MATERIALES Y EQUIPOS
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* Abate lenguas
* Hisopos estériles
* Cajas de Petri con medio decultivo agar sangre Cerebro corazón 2g/L
* Tubos de ensayo con medio de cultivo agar sangre
* Tubos de ensayo con medio de cultivo agar glucosa triptona (en g/L: D-glucosa, 10; triptona, 10; extracto de levadura, 1; rojo de fenol, 0.04; agar, 15)
* Peróxido de hidrógeno al 30%, conservado en refrigerador en frasco obscuro.
* Muestra de sangre
* Muestra de leche de vaca
*Portaobjetos
* Microtubos
* Jeringa esteril de 10mL
* Aguja de punción o un palillo aplicador
* Micropipeta de 20µL
* Puntas de 20µL
* Lámpara de mano
* Mechero de gas
* Marcador
* Incubadora

MÉTODO.
PRIMERA SESIÓN: AISLAMIENTO PRIMARIO.
1. Prepare dos cajas de Petri con agar sangre siguiendo las indicaciones del profesor.
2.Tomar la muestra de la cavidad oral y sembrarla en caja de Petri, siguiendo la técnica descrita a continuación:
a. Se debe dirigir hacia la cavidad oral abierta la luz de la lámpara de mano por sobre el hombro de la persona que obtiene la muestra, de modo que el hisopo pueda ser guiado hacia la faringe posterior.
b. Se instruye a la persona para que respire profundo y la lengua se...