Identificacion De Trisgliceridos Y Colesterol

Determinación de triglicéridos y colesterol en suero sanguíneo
La determinación de la concentración de triglicéridos y de colesterol total relacionado a HDL en sangre se lleva a cabo con el fin de obtener datos precisos sobre las implicaciones clínicas que dichas susbtancias tienen en el metabolismo del organismo. Este proceso se lleva a cabo mediante métodos espectrofotométricos en la región dela luz visible, pues cumplen con la ley de Beer, que relaciona en proporción directa la concentración del analito en cuestión con la intensidad del color de la muestra analizada, mismo que surge como resultado de numerosas reacciones químicas que comúnmente de llevan a cabo dentro de nuestro organismo y que serán descritas por separado a continuación.
Determinación de triglicéridos en sangreLos triglicéridos son lípidos que básicamente suministran energía a las células. Al igual que el colesterol, son transportados a las células del organismo por las lipoproteínas en la sangre. La medida de la concentración de triglicéridos se utiliza en el diagnostico y tratamiento de pacientes con diabetes mellitas, nefrosis, obstrucción hepática, y otras enfermedades incluyéndose desordenesmetabólicos de los lípidos o endocrinos. El diagnostico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.
Los triglicéridos en presencia de lipoproteinlipasa (LPL) liberan glicerol y ácidos grasos libres. El glicerol es fosforilado por glicerolfosfato deshidrogenasa (GPO) y ATP en presencia de glicerol quinasa (GK) para producir glicerol-3-fosfato (G3P) yadenosina-5-difosfato (ADP). El G3P es entonces convertido a dihidroxiacetona fosfato (DAP) y peróxido de hidrogeno (H2O2) por GPO. Finalmente el peróxido de hidrogeno (H2O2) reacciona con 4-aminoantipirina (4-AF) y p-clorofenol, reacción catalizada por la peroxidasa (POD) dando una coloración roja, la intensidad de la cual es proporcional a la concentración de triglicéridos presentes en la muestra ensayada.Determinación de colesterol total en sangre
El colesterol de la dieta se absorbe parcialmente y también se sintetiza en el hígado y otros tejidos. El colesterol se transporta en el plasma en las lipoproteínas. Se excreta a la bilis como tal o tras su transformación en ácidos biliares. La medida de la concentración del colesterol se utiliza en el diagnostico y tratamiento de la arteriosclerosisy enfermedad de las arterias coronarias. También se utiliza en el diagnostico de desordenes metabólicos de lípidos y lipoproteínas. El colestererol total depende de numerosos factores como la edad, el género, la dieta, la actividad física, etc. El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.
El colesterol presente en la muestra origina uncompuesto coloreado según la siguiente reacción. La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de colesterol presente en la muestra ensayada.
Objetivo
Determinar las concentraciones de triglicéridos y colesterol en suero sanguíneo.
Materiales y equipo
* 5 tubos de ensaye
* Gradilla
* Micropipeta de 100 μL
* Micropipeta de 10 μL
* Jeringa
* Alcohol
*Algodón
* Torniquete
* Tubo para suero sanguíneo
* Espectrofotómetro
* Baño térmico
Metodología
1.- Se extrajo 4 mL de sangre, y se colocó en un tubo para centrifuga.
2.- Después se colocó el tubo en la centrifuga por 5 min para obtener el suero sanguíneo.
3.- Se colocó el termo baño a una temperatura de 37 °C, colocando dentro una gradilla con tres tubos para triglicéridosy tres para colesterol, después cada uno se enumeró.
4.- A los todos los tubos de colesterol se les agregó 300 µL de reactivo R para colesterol, esto se debe realizar con los tubos dentro del termo baño.
5.-De igual manera se colocó en todos los tubos de triglicéridos 300 µL de reactivo R para triglicéridos, dentro del termo baño.
6.- Al tubo 1 se le agrego 3 µL de agua destilada.
7.- Al...