IDENTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS MEDIANTE LA REACCIÓN EL BIURET

.- IDENTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS MEDIANTE LA REACCIÓN EL BIURET
Entre las reacciones coloreadas específicas de las proteínas, que sirven por tanto para su identificación, destaca la reacción del Biuret. Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos ya que se debe a la presencia del enlace peptídico CO-NH que se destruye al liberarse los aminoácidos.
El reactivodel Biuret lleva sulfato de Cobre(II) y sosa, y el Cu, en un medio fuertemente alcalino, se coordina con los enlaces peptídicos formando un complejo de color violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de la concentración de proteínas.

MATERIAL BIOLÓGICO:   albúmina de huevo
  MATERIAL DE LABORATORIO: Tubos de ensayo, gradilla,   
 REACTIVOS  QUÍMICOS: Reactivo de Biuret

  Colocaren un tubo de ensayo 3ml de solución de albúmina al 1-2%.
1. Añadir 4-5 gotas de solución de Cu SO4 al 1%.
2. Añadir 3ml de solución de NaOH al 20%.
3. Agitar para que se mezcle bien.
4. Observar los resultados.
5. Colocar en un tubo de ensayo 3ml de de albúmina sin diluir y repite la operación.
¿Qué coloración da la reacción del Biuret? _____________________________
¿Una proteínacoagulada podría dar la reacción del Biuret? ________________
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Si se realiza la reacción del Biuret sobre un aminoácido como la Glicina ¿es positiva o negativa? ¿Por qué?
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Elabora un dibujo de la práctica.DESNATURALIZACION DE LAS PROTEINAS.
Si en una disolución de proteínas se producen cambios de pH, alteraciones en la concentración, agitación molecular o variaciones bruscas de temperatura, la solubilidad de las proteínas puede verse reducida hasta el punto de producirse su precipitación. Esto se debe a que los enlaces que mantienen la conformación globular se rompen y la proteína adopta laconformación filamentosa. De este modo, la capa de moléculas de agua no recubre completamente a las moléculas proteicas, las cuales tienden a unirse entre sí dando lugar a grandes partículas que precipitan. Además, sus propiedades biocatalizadores desaparecen al alterarse el centro activo. Las proteínas que se hallan en ese estado no pueden llevar a cabo la actividad para la que fueron diseñadas, enresumen, no son funcionales.
Esta variación de la conformación se denomina desnaturalización. La desnaturalización no afecta a los enlaces peptídicos: al volver a las condiciones normales, puede darse el caso de que la proteína recupere la conformación primitiva, lo que se denomina renaturalización.
Ejemplos de desnaturalización son la leche cortada como consecuencia de la desnaturalización de lacaseína, la precipitación de la clara de huevo al desnaturalizarse la ovoalbúmina por efecto del calor o la fijación de un peinado del cabello por efecto de calor sobre las queratinas del pelo. []
Las proteínas debido al gran tamaño de sus moléculas forman con el agua soluciones coloidales que pueden precipitar formándose coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a 70ºC o al ser tratadascon soluciones salinas, ácidos, alcohol, etc.
La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados que al actuar sobre la proteína la desordenan por destrucción de sus estructuras secundaria y terciaria.
MATERIAL BIOLÓGICO:   albúmina de huevo ( o leche ), limón
  MATERIAL DE LABORATORIO: 5 tubos de ensayo, gradilla    REACTIVOS  QUÍMICOS: HCl concentrado, alcohol etílico, jugo de limón, agua,

 PROCEDIMIENTO 
1. Colocar en tres tubos de ensayo una pequeña cantidad de clara de huevo (puede diluirse en un poco de agua para obtener una mezcla espesa) o 2-3ml de leche.
2. Al tubo 1 calentar uno de los tubos al baño María,
3. Al tubo N◦2 agregar 2-3ml de HCl concentrado
4. Al tubo N◦3 agregar 2 o 3ml de alcohol...