inclusión




Informe mEDIOS DE INCLUSIÓN



















Introducción

La inclusión se define como el medio de soporte del tejido a estudiar, que permitan cortarlas finamente sin destrozarlos y que minimicemos la deformación mecánica del tejido durante el proceso de corte.
El fundamento de estos procedimientos radica fundamentalmente en la ocupación de los espacios, ya seanintracelulares como extracelulares que inicialmente estaban llenos de agua.
Las características que deben tener un medio de inclusión son los siguientes:
-deben incorporarse el tejido en forma líquida y solidificarse
-obtener una consistencia adecuada para luego cortar
-debe ser miscible
-no afectar al tejido
En este práctico usaremos medios de inclusión como hidrófilos (agar, gelatina,OCT) e hidrófobos (parafina, paraplast).
De esta manera podremos comparar las ventajas y desventajas de cada uno.

Objetivos generales
Conocer el medio de inclusión en medios hidrófilos, como en el agar y gelatina
Conocer medio de inclusión en medio hidrófobo, como la parafina
Utilizar procesador automático y hacer procesamiento manual de muestras.
Objetivos específicos
Analizar cada mediode inclusión y conocer sus ventajas y desventajas
Conocer las ventajas y desventajas de un procesador automático y manual
Identificar el mejor medio de inclusión, según la naturaleza de la muestra




materiales y métodos
Materiales:
Pesa
Vasos precipitados
Probetas
Frascos
Guantes
Mascarilla
Campana
Incubadora
Vareta
Vidrio reloj
Pinzas
Bisturí

Método:
Inclusión en medioshidrófilos
1. Inclusión gelatina
1. Lavar bien el tejido en agua corriente (para evitar que la formalina endurezca la gelatina), mínimo 1 hora.
2. Impregnar con gelatina al 2,5 % a 37 º C por una hora
3. Colocar las muestras en gelatina al 5% a 37 º C por 3 horas
4. Incluir en molde adecuado con gelatina al 10% y dejar enfriar a 4º C. Durante toda la noche.
5. Tallar con una espátulacaliente y endurecer el bloque con Formol-Calcio al 4% durante 24 horas.
6. Realizar los cortes en crióstato o vibrátomo.
Cálculos para elaboración de gelatina:
Gelatina al 2,5% 2,5 gramos de gelatina en 100ml de agua destilada
Gelatina 5%  5 gramos de gelatina en 100 ml de agua destilada
Gelatina 10%  10 gramos de gelatina en 100 ml de agua destilada
Procedimiento:
La inclusión fueelaborada en moldes de cartulina de 4 cm por lado, en los cuales vertimos la gelatina e incluimos la muestra con la superficie deseada hacia la base del molde, nos fue muy fácil incluir la muestra ya que se puede ajustar la posición de la muestra sin que se endurezca el medio.
2. Inclusión en agar
· Lavar bien el tejido con agua corriente por 1 hora, cambiar a agua destilada
· Incluir en agar al 6%(calentado en microondas hasta su disolución y mezclar bien) utilizando recipientes de plástico o vidrio como moldes
· Dejar enfriar a temperatura ambiente, desmoldar y cortar en bloques
· Realizar los cortes en crióstato o vibrátomo.
Cálculos elaboración agar:
6 g de agar para 100 ml
X g de agar para 200 ml
X= 12 g, mezclar con 200 ml de agua destilada, calentar en microondas a potencia mediay sacar antes de que hierva.
Procedimiento:
La inclusión se llevó a cabo en moldes de papel cartulina de 4 cm por lado. Se deposita la muestra en el agar cuidando de rotular bien el proceso y se expone la cara de la muestra con la cual se espera comenzar a cortar hacia la base del molde. Finalmente, se enfría a temperatura ambiente y luego se desmolda, dependiendo si se pusieron 1 o dos muestrasse realizan los cortes necesarios según la proporción de medio de inclusión y muestra. Fue más fácil que con gelatina ya que el medio de agar es más denso, lo que permite una mayor adhesión de la muestra al lugar que elegimos para ella sin que esta se moviera tan fácilmente.
Inclusión en medio hidrófobo
1. Inclusión en parafina (procesador automático)
· Realice la inclusión de los tejidos...