INDUCCIÓN DE MUTANTES EN Escherichia coli

INDUCCIÓN DE MUTANTES EN Escherichia coli


ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
IPN

GENÉTICA MICROBIANA
DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGÍA



ANTECEDENTES
INDUCCIÓN DE MUTANTES EN Escherichia coli
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
IPN

GENÉTICA MICROBIANA
DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGÍA

MUTACIÓN:

Cambio en la secuencia de bases nitrogenadas en el
DNA de un organismo,éste cambio es heredable y
no es debido a la recombinación.

Marcador genético

 Cualquier gen que tiene un fenotipo identificable que puede ser

usado para el seguimiento de la presencia o ausencia de otros
genes del mismo fragmento de DNA transferido a al célula
 Puede ser usado para la elaboración de mapas genéticos o

localizar otros genes

Clasificación de las MutacionesMacrolesiones

Inserción
Deleción

Mutaciones de
corrimiento de
marco de lectura

Microlesiones

Transición
Sustitución

Transversión

CLASIFICACIÓN DE MUTACIONES
 Macrolesiones : Son las que alteran más de

1,000 nucleótidos de la molécula de DNA

 Microlesiones: Son las que se presentan con

mayor frecuencia según el numero de bases
afectadas.

INSERCIÓNSUSTITUCIÓN

CAMBIO EN LA SECUENCIA DE DNA.

Transiciones

Transversiones

Pu→Pu o Pi→Pi:
AT→GC
CG→AT
CG→TA
TA→CG
Pu→Pi o Pi→Pu:
AT→CG,
AT→TA,
GC→TA,
GC→CG,
TA→GC,
TA→AT,
CG→AT
CG→GC

SECUENCIA DE LA MUTACIÓN EN LA PROTEÍNA.
Mutación silenciosa

Tripletes que codifican para el mismo aminoácido:
AAG(arg)→CGG(arg)

Mutación con sentido
equivocado

Aparece un nuevo tripleteque codifica para un
aminoácido de distinto tipo. La proteína pierde su
función.

Mutación sin sentido

Aparece un triplete de terminación o FIN:
CAG(gln)→UAG(FIN)

Mutación silenciosa

CLASIFICACIÓN POR SU ORIGEN

 ESPONTANEAS: Son las que se producen por el mismo

metabolismo de la célula.

 INDUCIDAS : Surge como resultado de la influencia de

cualquier agente mutagénico.Cambios tautoméricos
de las cuatro bases
nitrogenadas.

Comparación de las relaciones de emparejamiento de bases normales con las disposiciones producidas por
los cambios tautoméricos.

Efecto de Bases no
Watson y Crick en la
replicación.

AGENTES MUTAGENOS
Agentes que pueden
causar daño al DNA

físicos
• Radiaciones (ultravioleta,
radiaciones ionizantes)
• Calorquímicos
 Análogos de bases
 Agentes modificadores de base
o Agentes alquilantes
o Agentes desaminantes
o Agentes hidroxilantes
 Agentes intercalantes

ANÁLOGOS DE BASES
Sustancias con estructura similar a
alguna de las bases

AGENTES ANÁLOGOS DE BASE:

5-bromouracilo
Mutágeno químico análogo
de bases
se incorpora en el ADN en lugar
de una timina, se aparea con la
adenina (ceto), yal cambiar de
forma (enol) se aparea con la
guanina y provoca una
sustitución de un par AT a un
par GC y GC a AT

bidireccional

ESQUEMA POR GENERACIONES
Efecto del 5-bromouracilo
induce transiciones GC-AT
y AT-GC
Forma enol

TRANSICION

Forma ceto

Forma ceto

Forma ceto

Forma enol
Relaciones de apareamiento del
5-bromuraciolo en su forma
ceto normal y en su estadoraro
enol

Forma enol

MODIFICADORES DE BASE

AGENTES ALQUILANTES

Transfieren grupos alquilo,
generalmente metilo o etilo, a
un átomo nucleofílico de las
bases nitrogenadas.

AGENTES MODIFICADORES DE BASE: ALQUILANTE

ETILMETANO SULFONATO (EMS)
Mutágeno químico
alquilante
alquilación del O6 de
la G. Y O4 de la
timina. Produce
transiciones del tipo
GCAT y TAGCbidireccional

AGENTES MODIFICADORES DE BASE: ALQUILANTE

ETILMETANO SULFONATO (EMS)
*
*
EMS
silvestre

El resultado neto es una mutación
GCAT

De EJ Gardner y D.P Snustad, Principles of Genetics, 5ª ed.

AGENTES DESAMINANTES

Desaminación: proceso en que un
grupo amino se convierte en un
grupo cetonico

amino

ceto

MODIFICADORES DE BASE

ÁCIDO NITROSO
GC-AT
Mutágeno...