Induccion a la fase sexual de la pestalotiopsis microspora

Inducción de la fase sexual de Pestalotiopsis microspora, un hongo productor de taxol
Pestalotiopsis microspora, aislada de NE-32, es un endófito del tejo del Himalaya (Taxus Wallichiana) que produce taxol, un importante medicamento quimioterápico utilizado en el tratamiento de canceres de mama y ovario. Las condiciones fueron determinadas para inducir la etapa perfecta (teleomorfo) de esteorganismo en el laboratorio como un primer paso critico para estudiar la herencia de los genes biosintéticos de taxol. La etapa perfecta de Pestalotiopsis microspora NE-32 se forma en un periodo de 3-6 semanas sobre el agua de agarosa con agujas de tejo seco a 16-20 °C con 12 horas de luz por día. El análisis morfológico de la teleomorfo y secuenciación de la ADNr 18S indica que Pestalosphaeriahansenii es la etapa perfecta de la pestalotiopsis microspora. Solo ciertas plantas (por ejemplo tejos, algunos pinos, nuez pacana, avena y algunas variedades de cebada) permiten la producción de peritecios. La extracción exhaustiva de cloruro de metileno de agujas de tejo (Taxus cuspidata) remueve su capacidad para inducir la producción de peritecios. El extracto de cloruro de metileno es capaz deinducir la formación de peritecios por cepa NE-32 en un sistema de bioensayo utilizando las vainas esterilizadas del cactus Cholla (Opuntia bigelovii), lo que indica que un compuesto químico (S) estimula la formación de la etapa perfecta. Este compuesto vegetal hidrófobo (S) ha sido designado el factor estimulante de peritecial (PSF). Los datos sugieren que los productos vegetales pueden desempeñarun papel en la regulación de de microbios endofíticos.
Palabras clave: Pestalotiopsis, Pestalosphaeria, taxol, teleomorfo, factor sexual
INTRODUCCIÓN
Un hongo común presente en plantas tropicales y semitropicales es Pestalotiopsis microspora. Aunque este organismo es un saprófito generalizado sobre la corteza y la materia de planta que se descompone, también es encontrado como un endófito enmuchas especies de plantas. Constantemente hemos aislado este organismo, durante años, a partir de una variedad de familias de planta y a partir de muchas áreas de la tierra donde las selvas tropicales existen. A pesar de su predominio, el papel de este hongo en la ecología de planta parece confuso. Sin embargo, nuestros estudios de este organismo sugiere que tiene potencial como un organismomodelo para estudios biológicos y bioquímicos en el laboratorio. El hongo parece ser genéticamente diverso al ser aislado casi siempre teniendo rasgos distintivos bioquímicos y fenotípicos. En condiciones de laboratorio puede tomar hasta ADN heterólogo, añadir el ADN telomérico, expresar el ADN heterólogo y reproducirlo independientemente del ADN cromosómico. Se ha sugerido que la actividad comparableen este hongo puede existir en la naturaleza, permitiéndole adaptarse fácilmente a una nueva planta incorporando ADN de la planta en su propio genoma. Un aislado de Pestalotiopsis microspora designado de NE-32, tubo la enorme utilidad potencial debido a que es un productor de taxol. Debido a nuestro interés en estudiar la genética de la ruta de la biosíntesis de taxol, perseguimos las condicionespara obtener la etapa perfecta de pestalotiopsis microspora aislada de NE-32. Pestalosphaeria, el teleomorfo de pestalotopsis ha sido observado después de muy largos (5-6 meses) periodos de incubación sobre la dextrosa de la papa en agar (PDA) a un plazo de tiempo que no es dócil con la investigación rutinaria en laboratorio. El teleomorfo de NE-32 nunca había sido producido en nuestrolaboratorio sobre la hoja clavel de agar usada para generar el anamorfo. Debido a que la etapa perfecta de Pestalotiopsis spp. ha sido reportada en sus respectivas plantas huésped, usamos las ajugas de Taxus spp. (Tejo, el huésped natural de Pestalotiopsis microspora NE-32) para producir estructuras de fructificación sexual. Además el trabajo en basidiomicetos mostraron que la luz adecuada y aeración,...