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NTE INEN 0170 (1975) (Spanish): Mantequilla.
Gérmenes comunes

CDU: 637 

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 Norma Técnica
Ecuatoriana

MANTEQUILLA
GERMENES COMUNES

AL 03.01-321

INEN 170
1975-02

Instituto Ecuatoriano de Normalización, INEN – Casilla 17-01-3999 – Baquerizo Moreno E8-29 y Almagro –Quito-Ecuador – Prohibida la reproducción

1. OBJ ETO
1.1 Esta norma tiene por objeto establecer el método para determinar el número de gérmenes comunes de
la mantequilla.
2. TERMINOLOGIA

2.1 Gérmenes comunes. Son las bacterias capaces de formar colonias cuando se promueve su desarrollo en
un medio de cultivo adecuado.

3. DISPOSICIONES GENERALES

3.1 Deberán cumplirse las disposicionesestablecidas en la Norma INEN 17.

4. RESUMEN

4.1 Se coloca la muestra de mantequilla (diluida o no) en un medio sólido de cultivo, se la incuba en
condiciones adecuadas, y se cuenta el número de colonias producidas.

5. INSTRUMENTAL

5.1 Cajas de Petri, de 10 cm de diámetro y 1 cm de altura; estériles.
5.2 Estufa de cultivo, con regulador de temperatura, ajustada a 38° ± 1 ° C
5.3 Autoclave.3

5.4 Pipetas aforadas de 1 cm ; estériles.
3

3

5.5 Pipetas de 10 cm , con graduaciones de 0,1 cm , estériles.
5.6 Frascos de vidrio, apropiados para efectuar las diluciones; estériles.
5.7 Aparato para recuento de colonias, provisto de un lente de tres aumentos y campo iluminado desde
abajo con luz blanca difusa.
5.8 Tubos de ensayo; estériles.
5.9 Baño María.

-1-

1975-00083NTE INEN 170

1975-02

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6. REACTIVOS
6.1 Extracto de carne, adecuado para análisis microbiológico.
6.2 Peptona., adecuada para análisis micro biológico.
6.3 Dextrosa, reactivo para análisis.
6.4 Agar, adecuado, para análisis microbiológico.
6.5 Agua destilada.

6.6 Medio de cultivo. Mezclar en un recipiente adecuado, 3 g de extracto de carne, 5g de peptona, 1g de
3dextrosa, 15g de agar y la cantidad suficiente de agua destilada para conseguir un volumen de 1000 cm .
Calentar la mezcla a ebullición para disolver los ingredientes y luego verterla en tubos de ensayo en cantidad
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aproximadamente igual a 12 cm por cada tubo. Tapar los tubos con algodón y esterilizar en autoclave
durante 15 minutos a 120° El pH final debe estar co mprendido entre 6,9 y 7,0 casocontrario debe
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repetirse la preparación.
7. PREPARACION DE LA MUESTRA
7.1 Si la muestra es semisólida o sólida, se coloca el recipiente que lo contiene cerrado herméticamente, en
una estufa o baño María entre 23° 28° se lo mant iene allí hasta que la muestra alcance tal temperatura
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(lo suficiente para ablandar la muestra completamente).
7.2 Homogenizar la muestra ablandada, agitandovarias veces el recipiente que lo contiene. SÍ la muestra no
presenta un aspecto fluido, calentar en baño María a no más de 45° y por un tiempo no mayor de 15 min .
C
7.3 Preparar la muestra para ensayo diluyendo la mantequilla en condiciones asépticas, con agua destilada
estéril conservada a 45° en proporciones de 1/10, 1/100, 1/1000 y otras que se consideren convenientes. Cada
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proporcióndebe conseguirse mediante diluciones sucesivas (ver nota 1).
8. PROCEDIMIENTO
8.1 La determinación debe efectuarse por duplicado sobre la misma muestra preparada y para cada grado
de dilución.
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8.2 En condiciones aséptivas y usando una pipeta caliente, transferir 1 cm de muestra (diluida o sin diluir
según convenga) a la caja de Petri.
8.3 Fundir en baño María el medio de cultivo...