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I. INTRODUCCIÓN

Las tinciones en microbiología son las primeras herramientas que se utilizan en el laboratorio para el diagnóstico de las enfermedades infecciosas. Hay una gran variedad de tinciones, que se han ido desarrollando para la detección de los diferentes agentes infecciosos en los que se incluyen bacterias, parásitos y hongos.
En esta primera clase aprenderemos y practicaremos lapreparación de una muestra para tinción simple de bacterias, el procedimiento y posterior reconocimiento de sus estructuras individuales y en grupo.
Se trabajaron con tres bacterias Escherichia coli, Staphylococcus sp y Bacillus sp, que nos ayudaron a lograr la tinción simple con facilidad, este método constituye una técnica simple y directa que a través del uso de colorante, nos permitecontrastar y diferenciar los microorganismos de su entorno.

II. OBJETIVOS

Ejecutar una preparación de muestra fija de bacterias para posterior tinción.
Observar las diferentes formas, tamaños y agrupaciones que presentan los microorganismos aplicando un método simple de tinción.

III. MARCO TEÓRICO

PREPARACION DE UNA MUESTRA FIJA DE BACTERIAS PARA TINCION

Los microorganismos especialmente lasbacterias, tienen poco contraste cuando se observan sin teñir al microscopio, por lo que se acostumbra teñirlos para aumentar el contraste con su entorno.
La tinción es un método para incrementar el contraste entre la célula y su entorno y por lo tanto contribuye a mejorar la imagen observada. Las técnicas de tinción con diversos colorantes facilitan la observación al aumentar notablemente el contraste.En la tinción generalmente se utiliza un colorante en el cual sus moléculas se absorben a una superficie. El uso de colorante permite cambiar el color de las células de los microorganismos y poder realizar la observación en microscopio óptico. (Rodríguez, 2005)

COLORANTE
En esencia los colorantes son sales en las que uno de sus iones tiene color y se denomina cromóforo. El cromóforo es todo grupoaislado, covalente e insaturado, que tiene una absorción característica. Se pueden presentar en dos formas fundamentales: en sistemas conjugados pi o complejos metálicos; la tinción se da cuando se une el cromóforo a un componente celular. Los auxócromos es otro componente del colorante, son grupos funcionales o radicales que constituyen una molécula y poseen carga parcial positiva; tienen lafunción de intensificar la formación de color mediante la acción de grupos de átomos no saturados.
Los colorantes se clasifican en básico, ácidos y neutros, según sea la carga del grupo cromógeno. La nigrosina y la fucsina acida son colorantes ácidos; en tato el azul de metileno, la fucsina básica (carbolfucsina), el cristal violeta, la safranina, el verde malaquita y el rojo neutro son colorantesbásicos; algunos colorantes son neutros, como el Giemsa, el Wright y el Leishman. (Rodríguez, 2005)
Los colorantes tienen las siguientes funciones:

1. Permiten hacer visibles a los objetos microscópicos y transparentes.
2. Revelan su forma y tamaño.
3. Muestran la presencia de estructuras internas y externas.
4. Producen reacciones químicas específicas.

En Microbiología todas las tinciones serealizan a partir de suspensiones de microorganismos extendidas en un portaobjetos, secadas y fijadas. La fijación, procedimiento que permite preservar estructuras celulares, se puede llevar a cabo con diferentes tratamientos: fijación por calor o fijación química. La fijación por calor es la más utilizada para la observación de bacterias. Este procedimiento consiste en pasar el portaobjetos, con lasuspensión bacteriana extendida y seca, a través de una llama de un mechero. La fijación por calor preserva la morfología externa de los microorganismos pero no las estructuras internas. La fijación química con agentes como etanol, formaldehido y ácido acético entre otros muchos, se utiliza para preservar las estructuras celulares. Esta tinción dependerá de la compasión química de la célula...