Influencia De La Concentración Del Sustrato En La Velocidad Inicial (Vo). Determinación De Km Y Vmax

Páginas: 4 (765 palabras) Publicado: 19 de abril de 2011
Universidad del Valle de México
Campus Coyoacán

Laboratorio de Tecnología Enzimática

Practica #3 INFLUENCIA DE LA CONCENTRACIÓN DEL SUSTRATO EN LA VELOCIDAD INICIAL (Vo). DETERMINACIÓN DE Km YVmax

INFLUENCIA DE LA CONCENTRACIÓN DEL SUSTRATO EN LA VELOCIDAD INICIAL (Vo). DETERMINACIÓN DE Km Y Vmax

Objetivos
-Observar el efecto de la concentración de sustrato en la velocidad dereacción de una enzima.
-Determinar la constante de Michaelis-Menten (Km) y la velocidad máxima (Vmax) de la enzima.

Introducción.

La actividad enzimática se expresa habitualmente en micro moles(mol) de sustrato convertido en producto por minuto, en determinadas condiciones de ensayo especificadas. Una unidad estándar de actividad enzimática (U) es aquella actividad que cataliza latransformación de 1 mol min-1 de sustrato. La actividad específica de una preparación enzimática se define como el número de unidades de enzima por miligramo de proteína. Sin embargo, esta expresión no indicasi en la muestra analizada la única proteína presente es el enzima; durante la purificación de las enzimas. La constante catalítica, o número de recambio, para un enzima es igual a las unidades deactividad enzimática por mol de enzima. En aquellos casos en los que hay más de un centro catalítico, la constante catalítica se refiere, a menudo, a la masa molecular de la subunidad y no a la masamolecular de la proteína completa.

La constante catalítica o número de recambio permite una comparación directa de la capacidad catalítica relativa entre enzimas. La velocidad máxima, Vmax, es lavelocidad obtenida en condiciones de saturación del enzima por sustrato en unas condiciones determinadas de pH, temperatura y fuerza iónica. La Vmax es constante para una concentración determinada deenzima.

Interacción de enzima sustrato

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