Informe Adn

Resumen.
La siguiente práctica tuvo como objetivo principal el aislamiento de ADN de una fuente bacteriana a través de un método de extracción, evidenciando algunas de sus propiedades tales como su capacidad de absorción de luz UV, su efecto hipercrómico, entre otras. Para la extracción de la molécula de ADN se utilizan diferentes procedimientos ya sean físicos, químicos o enzimáticos que sonideales ya que los mismos poseen la fuerza necesaria para romper el material celular (tejido) y delicadeza requerida para preservar la dicha molécula. Las dos cadenas de nucleótidos que constituyen una molécula de ADN, se mantienen unidas entre sí porque se forman enlaces entre las bases nitrogenadas de ambas cadenas que quedan apareadas. La unión de las bases se realiza mediante puentes dehidrógeno. Para el caso se empleó una combinación entre el método físico y químico ya que se utilizó homogenización mecánica (centrifugación), homogenización en solución y utilización de reactivos químicos tales como detergentes, alcoholes, entre otros. Luego de separar la molécula de ADN de los otros componentes del cultivo bacteriano se utilizo el método espectrofotométrico para comprobar sucapacidad de absorción de Luz UV obteniendo para la molécula nativa de Abs260 y Abs280 (1.010±0.001)U.A y (0.057±0.001)U.A respectivamente, luego de suministrarle una cantidad necesaria de calor se obtuvo unas Abs260 Abs280 de (0.155±0.001)U.A y una Abs280 de (0.0.102±0.001)U.A, con estos valores se pudo determinar el grado de pureza a la cual se obtuvo el ADN para la molécula nativa y desnaturalizada,los resultados conseguidos fueron de (1,77±0.01) y (1,52±0.01) respectivamente.
LA INTRODUCCIÓN NO VA PARA LOS INFORMES.
Tablas de Recolección de Datos Experimentales.
Tabla #1: Absorbancias obtenidas para la molécula de ADN nativa y desnaturalizada individuales.

Absorbancias Individuales

Nativa
Desnaturalizada
Grupos
A260 (U.A)
A280 (U.A)
A260 (U.A)
A280 (U.A)
Génesis-Susan0,173
0,101
0,196
0,119
Deisy
0,165
0,094
0,23
0,131
Armeliz
0,15
0,085
0,243
0,165
Wilmary-Ricardo
0,101
0,057
0,155
0,102

Tabla #2: Absorbancias obtenidas para la molécula de ADN nativa y desnaturalizada promedio.
Absorbancias Promedio.
Nativa
Desnaturalizada
A260 (U.A)
A280 (U.A)
A260 (U.A)
A280 (U.A)
0,14725
0,08425
0,206
0,12925

Tablas de Resultados.
Tabla #3:Pureza obtenida para la molécula de ADN luego de ser extraída de un Cultivo Bacteriano.
Pureza
Nativa
Desnaturalizada
1,772
1,520

Tabla #4: Pureza obtenida para la molécula de ADN luego de ser extraída de un Cultivo Bacteriano promedio.
Pureza
Nativa
Desnaturalizada
1,748
1,594

Metodología.
Se tomó una muestra de un Cultivo Bacteriano el cual se llevó a Centrifugación durante unminuto, luego se desalojo el sobrenadante, solo dejando un volumen de 0.4mL, a esta solución se le añadió 15uL del detergente Tide Free 2X Ultra para ser llevada a incubación por 10 minutos. Al término de este tiempo se le adicionó 750uL de n-butanol para ser llevada a centrifugarse durante 5 minutos, después de transcurrir los minutos necesarios se tomaron 200uL de la capa orgánica la cual fuetraspasada a un tubo nuevo para que seguidamente a esto se le fuera añadido 700uL de 2-propanol, agitando la solución durante 5 minutos aproximadamente. Posteriormente se tomaron 200uL de la solución obtenida a la cual se le adicionaron 700uL de etanol para luego ser sometida a centrifugación por 5 minutos, el sobrenadante fue retirado y el solido se dejó secar durante 10 minutos. Luego se prosiguiócon la adición de 50uL de NaOH y se mezcló durante 2 minutos aproximadamente. Se tomó 20uL de dicha solución la cual se le fue adicionada 980uL de NaCl, la misma fue llevada a un espectrofotómetro donde se le fue medida la absrobancia a 280 y 260. Por ultimo se sometió la solución a altas temperatura durante 10 minutos y fue llevado nuevamente al espectrofotómetro y fue tomada la medida a 280...