Informe Biologia

TRABAJO PRACTICO N°1 DE BIOLOGIA
“Acción de la enzima catalasa”

Objetivo: Investigar el efecto de la concentración de sustrato sobre la velocidad de una reacción catalizada por una enzima
Introducción:
Una enzima es una proteína que cataliza las reacciones bioquímicas del metabolismo. Las enzimas actúan sobre las moléculas conocidas como sustratos y permiten el desarrollo de los diversosprocesos celulares1.
A lo largo del trabajo tuvimos en cuenta los 1 de los 3 factores que influyen en la acción enzimática, y estos son la temperatura, el PH y la concentración del sustrato. Nuestro trabajo se concentró en la concentración del sustrato.
El peróxido de hidrogeno es una sustancia química reactiva, que se usa para desteñir el pelo. También, se está formando constantemente en las célulasvivas como producto de deshecho durante los procesos asociados con la respiración y necesita ser destruido inmediatamente para que se evite cualquier daño que se pueda producir en las células. La catalasa (Fig.1), la enzima responsable, es la más rápida para actuar que se conoce. En este caso la reacción química es 2 H202 2 H20 + O2.




Fig.1:










Hipótesis:Cuanto mayor sea laconcentración del sustrato, mayor es la cantidad de burbujas liberadas.

Variables: Las variables que se tuvieron en cuenta


1. Variable independiente: concentración de H2O2
2. Variable dependiente: liberación de oxigeno (O2)
3. Variables controladas: temperatura en la cual se encuentran los tubos con la suspensión de hígado (30°C), el tiempo de observación de la reacción de cada uno de los 5 tubos deensayo (30seg), la concentración de la suspensión de hígado (1cm3) y la concentración de H2O2 (10%, 20%, 30%, 40% y 50%)
Control Variables
1. Variable independiente: fuimos midiendo las cantidades empleadas con una pipeta
2. Variable dependiente: en un tiempo de 30 segundos, cronometrados, contamos la cantidad de burbujas de O2 liberadas
3. Variables controladas: la temperatura era controladamediante un termómetro constantemente (+/- 1C), el tiempo lo medimos con un cronometro (+/- 0.1s), y las concentraciones fueron medidas con la pipeta proporcionada por el laboratorio (+/- 0.1ml)
A lo largo de este trabajo intentaremos probar en qué medida aumenta la cantidad de oxigeno liberado si usamos diferentes concentración de sustrato (H2O2) así evidenciando la influencia en la enzima catalasa.Materiales:

a- Suspensión de hígado
b- Agua destilada
c- Peróxido de hidrogeno de distintas concentraciones
d- Pipetas
e- Tubos de ensayo
f- Vasos de precipitación
g- Soporte Universal
h- Tubo acodado
i- Tapón de goma perforado







Fig.2:


Desarrollo:
Cuando llegamos al laboratorio nos encontramos con 5 tubos de ensayo de 1cm3 de suspensión de hígado y 5 probetas con distintas concentracionesde peróxido de oxigeno (H2O2) previamente preparadas por la ayudante de laboratorio. El primer paso fue rotular cada tubo de ensayo a excepción del sexto tubo que lo íbamos a utilizar para ir colocando las diferentes concentraciones de peróxido. El segundo paso fue colocar los 5 tubos rotulados y con la suspensión de hígado en una máquina que los calentaba a 30°C. Luego de esperar a que todosestén a la temperatura óptima fuimos vertiendo del 1ero al 5to con las distintas concentraciones (10%, 20%, 30%, 40% y 50%) de peróxido. Cada vez que vertíamos este concentrado de peróxido debíamos rápidamente tapar con el tubo acodado dentro del tapón de goma perforado y llenamos de agua el vaso de precipitados, donde el extremo del tubo acodado terminaba. De esta manera cada vez que se liberaba 02se podía ver en forma de burbuja y así, con la ayuda del cronometro, contabilizábamos las burbujas en un tiempo de 30 segundos. En los casos que esto se complicaba usábamos los teléfonos celulares para grabar en cámara lenta y poder visualizar bien cada burbuja saliendo. Una vez finalizado esto con el primer tubo de ensayo lo posábamos sobre un sostenedor de tubos de ensayo y hacíamos lo mismo...