INFORME bioquimia

1. INTRODUCCIÓN

El ácido desoxiribonucleico (ADN), una molécula presente en todos los seres vivos, incluyendo muchos virus (adenovirus), es la portadora de la herencia. Gracias a los trabajos de Watson y Crick en 1953. Watson y Crick describieron el modelo de las formas A y B del ADN mediante la interpretación de fotografías de difracción de rayos X obtenidas de fibras de ADN nativo, es decir,extraído de células. Sin embargo, la magnitud de la información que puede obtenerse de este tipo de estudios es limitada, debido a que las fibras de ADN son extremadamente largas, no cristalizan y habitualmente presentan un cierto desorden estructural.

El ADN es un ácido nucleico que funciona como soporte físico de la herencia en el 99% de las especies. La molécula, bicatenaria, esta formadapor dos cadenas antiparalelas y complementarias entre sí. Su unidad básica, el nucleótido, consiste en una molécula del azúcar desoxirribosa, un grupo fosfato, y una de estas cuatro bases nitrogenadas: adenina, timina, citosina y guanina.

Estas dos cadenas de nucleótidos que constituyen una molécula de ADN, se mantienen unidas entre sí porque se forman enlaces entre las bases nitrogenadas deambas cadenas que quedan enfrentadas. La unión de las bases se realiza mediante puentes de hidrógeno, y este apareamiento está condicionado químicamente de forma que la adenina (A) sólo se puede unir con la Timina (T) y la Guanina (G) con la Citosina (C).

En cuanto a la estructura general de un determinado ADN está definido por la “secuencia” de las bases nitrogenadas en la cadena de nucleótidos,.El orden en el que aparecen las cuatro bases a lo largo de una cadena en el ADN es, por tanto, crítico para la célula, ya que este orden es el que constituye las instrucciones del programa genético de los organismos. La estructura en doble hélice del ADN, con el apareamiento de bases limitado ( A-T; G-C ), implica que el orden o secuencia de bases de una de las cadenas delimita automáticamente elorden de la otra, por eso se dice que las cadenas son complementarias. Una vez conocida la secuencia de las bases de una cadena ,se deduce inmediatamente la secuencia de bases de la complementaria.El ADN regula la actividad celular, debido a la síntesis de proteínas que en su mayoría son enzimas. La información necesaria para la síntesis de proteínas se encuentran en el DNA en forma de clave queestán representan por la secuencia de las bases nitrogenadas.

II. OBJETIVOS

Extraer el ADN a partir de una muestra biológica.
Reconocer microscópicamente el ADN, haciendo uso de un colorante.
2. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL




MATERIALES:

Hígado de pollo
Alcohol de 96 %
Cloruro sódico 2M
Detergente
Gasa
Varilla de vidrio
Mortero
Vasos de precipitado
Pipeta
Probeta


TECNICA:
1. Trituramos10 gramos de hígado de pollo en un mortero para romper las membranas y queden los núcleos sueltos. (Fig.1)

2. Trituramos el hígado con 15 centímetros cúbicos de solución salina fisiológica. Remover hasta hacer una especie de papilla o puré.  (Fig.2)

3. Filtramos la mezcla con gasa de tres capas para separar los restos de tejidos que hayan quedado por romper. (Fig. 3)
4. Medimos elvolumen del filtrado  (Fig. 4)


3. FIGURA 3

4. FIGURA 4

5. Añadir al filtrado un volumen igual de cloruro sódico 2M. Con esto conseguimos producir el estallido de los núcleos para que queden libres las fibras de cromatina.  (Fig. 5)
6. A continuación se añade 1gr. De detergente .La acción de este detergente es formar un complejo con las proteínas y separarlas del ADN. Así nos quedará el ADNlibre de las proteínas que tiene asociadas.   (Fig. 6)


5. FIGURA 5

6. FIGURA 6

7. Añadir mediante una pipeta alcohol de 96%.
8. Hay que hacerlo de forma que el alcohol resbale por las paredes del vaso y se formen dos capas. En la interfase, precipita el ADN.  (Fig. 7)
9. Introducir una varilla de vidrio e ir removiendo en la misma dirección. En la fotografía número 9 se indica...