informe bioquimica



Facultad de medicina
Escuela de obstetriciaDepartamento: Ciencias Biológicas y Químicas.

Laboratorio de Bioquímica General
Informe Trabajo Práctico Nº 1
“Cuantificación de proteínas, denaturación y aislamiento de proteínas”Resumen:
La finalidad de este laboratorio es, comprender la cuantificación de proteínas, el cual es un proceso que implica la utilización de la reacción de biuret y un espectrofotómetro ajustado a 546nm con el fin de medir la concentración de proteínas presentes en un suero patológico, normal y estándar. La denaturación es la coagulación de la proteína, el cual la hace perder sufuncionalidad biológica debido a un agente desnaturalizante que pueden ser: ácidos fuertes, alcalinos fuertes y temperaturas sobre 50º, en este práctico para demostrar tal situación se utilizo él acido tricloroacetico al 10% y agua hervida.
El aislamiento de las proteínas fue un tratamiento utilizado en el laboratorio, con el fin de estudiar la composición y estructura de una proteína presente en la clarade huevo llamada ovoalbúmina; para lograr hacer esta técnica se deben ocupar métodos de solubilidad con la ayuda de una centrifuga clínica. A través de esta serie de tratamientos se logra estudiar la composición química estructura y rol biológica de las proteínas.













Introducción
Las proteínas ocupan un lugar de máximaimportancia entre las moléculas constituyentes de los seres vivos (biomoléculas). Prácticamente todos los procesos biológicos dependen de la presencia o la actividad de este tipo de moléculas (Berg et al, 2008). Para cumplir esta diversidad de funciones cada tipo de célula en cada organismo posee varios miles de clases de proteínas. (Mathews, 2002) .Existen diversos mecanismo que nos ayudan aanalizar las estructuras funcionales de las proteínas, la concentración de estas en medios específicos (sueros), y el aislamiento de estas macromoléculas el cual provoca que esta precipite llegando a su punto isoeléctrico.

La técnica de la absorciometría consiste en calcular la cantidad de fotones absorbido en una solución. La Absorbancia es la cantidad de luz que es absorbida por una solución dedeterminada concentración a una longitud de onda fija, se mide a través de un espectrofotómetro, que contiene una fuente de luz, un monocromador, luz incidente, una cubeta con proteínas y un detector. Este es un método indirecto para saber las concentraciones de una sustancia.
La curva de calibración consiste en medir la Absorbancia de varios tubos que contienen concentraciones conocidas de unasustancia determinada.
Si se eleva lo suficiente la temperatura o hacemos que el pH sea fuertemente acido o alcalino, o bien añadimos al disolvente algunos tipos de moléculas orgánicas, como alcoholes o urea, se despliega la estructura de la proteínas. Como con los ácidos nucleicos, este proceso se llama desnaturalización porque se ha perdido la estructura natural de la proteína, junto con lamayoría de sus propiedades especificas. (Mathews, 2002).
Comúnmente se utiliza el aislamiento de proteínas para estudiar su composición y su estructura, para dicha purificación se emplean métodos basados en sus propiedades de solubilidad, centrifugación, cromatografía, diálisis y ultrafiltración. En el práctico solo utilizamos la centrifugación: Puede decirse que cualquier partícula sometida a un...