informe bioquímica 1

Facultad de química y biología
Departamento de biología



Separación y purificación de ALBUMINA SERICA DE BOVINO y FOSFATASA ACIDA DE GERMEN DE TRIGO por medio de exclusión molecular, método de Bradford y SDS-PAGE.







Nombres: Bryan JofréCristopher Riquelme
Curso: Bioquímica
Profesor: Jeffri Retamal Santibañez


Resumen
En este informe trabajamos con una muestra de proteínas ynos enfocamos en su purificación por medio de una cromatografía de exclusión molecular, para luego determinar la concentración de cada proteína por medio del método de Bradford, finalmente se realizó una electroforesis en gel en condiciones desnaturantes para lograr tener una estimación de los pesos moleculares. Nuestros objetivos ya mencionados, no se llevaron a un 100%, ya que durante lasexperiencias hubo muchas variables que interfirieron en nuestros resultados. Como primer atenuante se destaca que nuestra muestra inicial no contenía 3 proteínas como se debía ya que no se contaba con citocromo c, luego en el momento de la cromatografía no ocupamos azul de dextrano como marcador lo que nos limitaba a no apreciar nuestra columna y diferenciar la elución de las muestras. Además de quelas proteínas a analizar, en este caso BSA y fosfatasa acida poseen tamaños moleculares muy similares, lo que indica que su separación debe ser muy precisa. Esto afecto directamente a la determinación de los peaks. Estos atenuantes se comprueban finalmente con el método de Bradford, ya que nos indicaba que solo una muestra había marcado una cantidad despreciable de proteínas. Finalmente con laelectroforesis y posterior análisis de la imagen obtenida, logramos concluir que ninguna de nuestras muestras contenía proteínas puras. lo que nos lleva a decir que el error se cometió con la cromatografía ya que quizás las muestras se demoraban mas en bajar, incluso el gel sephadex ocupado tenía mayor porosidad, lo que no era el indicado para nuestra experiencia.







IntroducciónLas proteínas son moléculas grandes que se encuentran formadas por la unión de varios aminoácidos. Estas proteínas cumplen una función esencial en el organismo, ya que están asociadas a todos los procesos biológicos que ocurren en el cuerpo.
Las proteínas son importantes para el desarrollo y formación de hormonas, proteínas plasmáticas, vitaminas, enzimas, entre otras. Cabe destacar que también sonparticipe de todos los procesos defensivos de nuestro sistema inmune participando de manera directa en forma de anticuerpos, contra infecciones o agentes extraños.
Las funciones de las proteínas se relacionan directamente con la conformación de estas, es decir, la estructura química que poseen. Como habíamos mencionado, son largas cadenas de aminoácidos que se unen por medio de un enlace pepitico oamida. Estas estructuras se presentan en 4 grupos definidos como primaria, secundarias, terciaria y cuaternaria, la mayoría de las proteínas se encuentra en estado terciario ya que en esta disposición la mayor parte de las proteínas es específica de cada molécula, además, determina su función.
Se hace evidente que el estudio de la función o propiedades de una proteína como, su secuencia.Actividad u organización estructural son de una gran importancia. Para ello debemos trabajar con muestras que se encuentran puras. Los métodos más utilizados para la purificación de proteínas, se basan principalmente en el tamaño, carga o capacidad de unión. El método más conocido para llevar a cabo un fraccionamiento son las cromatografías, a su vez, las más usadas y convenientes son la de exclusión...