Informe catecolasa

Bioquímica GRUPO 2
Laboratorio 5 Factores que afectan la actividad de las enzimas catecolasa
1. Marco teórico

En esta práctica se desarrolló un estudio analítico cualitativo, para determinar la actividad catalítica de la
catecol oxidasa, presente en un material biológico. Este estudio se realizó en muestras de papa. Se
extrajo la enzima catecolasa y se analizaron factores detalla acontinuación. Esta práctica se dividió en 6
experimentos que determinan estos factores, determinando cado uno, estos son: 1. V erificación de la
actividad enzimática se analizaron tres tubos de ensayos con diferentes soluciones, en el tubo 1 contenía
Extracto enzimático y catecol. Tuvo 2 contenía extracto enzimático y agua destilada, por último el tubo 3
catecol y agua destilada (ver cuadro 1. Guíarespectiva). Luego se llevaron los tubos a un baño maria 37 °C
durante 25 minutos Donde se observaba los cambios de color en cada uno de los tres ensayos. 2. Efecto de
la temperatura se procedió a agregar 1 ml del extracto y un 1 mL de catecol. En tres tubos de ensayos,
donde se dejaban a diferentes temperaturas observando si hubo cambios de color en estas. 3. Especificidad

por el sustratoen este ensayo se pipetearon (ver cuadro 2, guía respectiva) diferentes reactivos en 8 tubos
de ensayo donde se comparaban los 1 y 2; 3 y 4; 5 y 6; 7 y 8, analizando cada tubo.4. Naturaleza química de
las enzimas se pipetearon (ver cuadro 3. Guía respectiva) en cuatros tubos de ensayos, donde se llevó a T de
34°C por 10 min. Luego de este tiempo se agregó 1 mL de catecol, donde se continuó elcalentamiento por
15 min. Se observó y se registró los datos obtenidos 5 . Efecto del pH sobre la actividad de la catecolasa se
analizaron 4 tubos de ensayos con diferentes reactivos (ver cuadro 4. Guía respectiva). Se procedió a realizar
el mismo procedimiento que el anterior ensayo y por último el ensayo 6.Efecto del ácido cítrico sobre la
actividad de la catecolasa se realizó el corte detrozo de papa aproximadamente 5 mm de espesor y se dividió
en dos partes iguales, al instante se raspo la superficie de ambos trozos con una cuchilla con el objetivo de
liberar la enzima catecolasa por rompimiento célula y se cubrió completamente uno de los trozos con agua
destilada y al otro con ácido cítrico. Después de 1 minuto se cubrió ambos trozos con catecol. Luego de 5
minutos se observóque pasaba en ambos experimentos.
3. Palabras clave: la actividad enzimática, actividad de la catecolasa, catecol, Naturaleza química de las

enzimas, Especificidad por el sustrato, Papaína, Buffer pH, pardeamiento enzimático, holoenzima y
apoenzima
4. Abstract: enzyme activity, catecholase activity, catechol, Nature enzyme chemistry, substrate specificity, papain,
Buffer pH, enzymaticbrowning holoenzyme and apoenzyme
5. Key Words
In this practice we developed a qualitative analytical study to determine the catalytic activity of catechol oxidase,
present in a biological material. This study was conducted in potato samples. Catecholase enzyme was extracted
and analyzed continuation detailed factors. This practice was divided into six experiments that determine these
factors,determining one market, these are: 1. Verification of the enzymatic activity was analyzed three different

test tubes with solutions contained in the tube 1 and catechol enzymatic extract. Had 2 contained enzyme extract
and distilled water, finally catechol tube 3 and distilled water (see Table 1. Respective Guide). Tubes then led to a
37 ° C water bath for 25 minutes where color changesobserved in each of the three trials. Two. Effect of
temperature proceeded to add 1 ml of the extract and 1 mL of catechol. In three test tubes, which were left at
different temperatures if there observing color changes in these? Three. Substrate specificity in this trial were
pipetted ( see Table 2 , respective guide ) reagents in 8 different test tubes which were compared 1 and 2 , 3 and 4
, 5...