Informe completo de Cromatografia



TÈCNICAS DE IDENTIFICACIÒN Y SEPARACIÒN CROMATOGRÀFICAS
Camilo Andrés Valderrama Durango a Jhony Andrés Bolaños Trochez b
acamilo.andres.valderrama@correounivalle.edu.co;
B Jhony.bolanos@correounivalle.edu.co
Facultad de Ciencias Naturales y Exactas, Tecnología Química, Universidad del Valle, Sede Yumbo, Colombia
Fecha de realización: 18 de septiembre del 2014
Fecha de entrega: 25 deseptiembre del 2014
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1. RESUMEN
En el ejercicio de laboratorio se realizaron dos procedimientos, la cromatografía de columna y de capa delgada. La primera consistió en un montaje sobre una columna, la cual contenía fase estacionaria y móvil, para luego poder separar una mezcla de tintes (azul de metileno y fluoresceína).En la segunda también se separó la misma mezcla, pero con un montaje distinto que consistía en tener dos placas, donde sobre estas estaba la fase estacionaria y en la parte inferior un capilar con la mezcla, las placas se adicionaron en un vaso cada una, los cuales contenían una mezcla de fase móvil en diferentes proporciones cada una (1:10 y 10:1) para etanol y agua respectivamente. Además deseparar la mezcla de tintes, el objetivo era analizar lo que pasaba con las fases tanto estacionaria como móvil para ambos procedimientos, y para la cromatografía de capa delgada calcular la movilidad relativa Rf que arrojó como resultado para fluoresceína 0,96 y 0.84 para las proporciones 1:10 y 10:1 respectivamente, mientras que para el azul de metileno conservando el mismo orden arrojó 0.00 y0.12.
Palabras clave: Fluoresceína, azul de metileno, cromatografías (columna y capa delgada), fase móvil, fase estacionaria

1. OBJETIVOS
-Comparar las distintas técnicas de cromatografía vistas con respecto a la velocidad de separación.
-Evaluar cómo influyen los compuestos utilizados como fase móvil y fase estacionaria en las dos técnicas de cromatografía
-Analizar en cuales procedimientos seadquirieron errores, explicando sus causas.
-Verificar como actúa el valor Rf en la identificación compuestos presentes en una mezcla.
2. INTRODUCCIÒN
La técnica de separación de cromatografía en capa fina consta de un sistema de dos fases, una sólida (Fase estacionaria) que se aplica en forma de capa delgada, absorbente, usualmente entre 0.25mm de grueso para fines analíticos. No obstante, en loscasos donde se pretende aislar un compuesto, el grosor puede variar entre 0.5-2.0 mm. Esta capa está fijada a una placa o lámina firme de vidrio, aluminio o plástico que actúa como soporte. A través de la fase estacionaria transita un líquido o solvente (fase móvil o eluyente). De los tres materiales usados como soporte, el vidrio es el más popular. En la figura 1 se muestra un montaje típico decromatografía en capa fina [1].


Figura 1. Montaje cromatografía capa fina [GUARNIZO, ANDERSON]
En la técnica de cromatografía en columna, se utiliza una columna de vidrio vertical que se llena con un soporte sólido adsorbente, por ejemplo en la fase estacionaria los más empleados son gel de sílice (SiO2) y alúmina (Al2O3). La muestra que se quiere separar se deposita en la parte superior de estesoporte; mientras el resto de la columna se llena con el eluyente o disolvente que constituye la fase móvil, el cual por efecto de la gravedad hace mover la muestra a través de la columna. Con lo anterior, se establece un equilibrio entre el soluto adsorbido en la fase estacionaria y el disolvente eluyente que fluye por la columna, debido a que cada uno de los componentes de una mezcla estableceráinteracciones diferentes con la fase estacionaria y la móvil, y serán transportados a diferentes velocidades consiguiendo finalmente su separación. La descripción de este montaje se puede observar en la figura 2. [2].








Figura 2. Montaje de Cromatografía de columna [universitat de Barcelona U.B]
3. METODOLOGÍA EXPERIMENTAL
En la técnica de cromatografía de columna (CC) se medió 4.0 gramos...