Informe Cultivo De Tejidos Vegetales

MÉTODO DE DESINFECCIÓN DE CULTIVO in vitro DE TEJIDOS VETALES
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David Anaguano1, Gabriela Cueva1, Karina Jácome1
1 Departamento de Ciencias de la Vida, Ingeniería en Biotecnología, Escuela Politécnica del Ejército. Sangolquí, Ecuador. Sexto “B”. Cultivo de Tejidos .2011.

Resumen

La práctica realizada reporta los diferentes medios para ladesinfección in vitro de los diferentes explantes obtenidos de una especie herbácea, para sembrarla en condiciones de asepsia, donde se realizo con dos tiempos distintos entre los diferentes grupos, donde los resultados obtenidos con la aplicación de NaClO 2% durante 15 minutos no conservaron las condiciones de asepsia para el cultivo, ya que existió contaminación tanto de hongos como de bacterias.Palabras clave: in vitro, explante, desinfección

Abstract

The practice carried reports the various methods of disinfection in vitro from different explants obtained from a herbaceous species, to plant in sterile conditions, which was conducted with two different times between different groups, where the results obtained with the application of NaClO 2% for 15 minutes did not wascontamination both fungi/bacteria.

Keywords: in vitro, explants, disinfection.

INTRODUCCIÓN

La expresión cultivo in vitro de plantas significa cultivar fragmentos de plantas dentro de un frasco de vidrio en un ambiente artificial. Esta forma de cultivo tiene dos características fundamentales: la asepsia (ausencia de gérmenes), y el control de los factores que afectan el crecimiento (BSV,2010)

Para la introducción de cualquier especie vegetal al cultivo in Vitro, se hace necesario superar la etapa previa de la determinación del método de desinfección y el tipo de explante más adecuados, ya que la contaminación en el medio de cultivo siempre es alta, considerando que las plantas, en condiciones naturales de crecimiento, están asociadas a microorganismos endógenos y exógenos queencuentran condiciones favorables de desarrollo en dichos medios nutritivos (Gómez, 2009).
Es necesario obtener explantes con un nivel nutricional y un grado de desarrollo adecuados, para establecer el cultivo asépticamente. Para obtener estos explantes es recomendable mantener a las plantas madre durante un período que puede oscilar entre unas semanas o varios meses en un invernadero bajocondiciones controladas, en el cual la planta se cultiva en condiciones necesarias para obtener las características que permitan un crecimiento vigoroso y libre de enfermedades (Gómez, 2009).

Dentro de las sustancias utilizadas en la desinfección del material vegetal se encuentran el hipoclorito de sodio (NaClO), hipoclorito de calcio (CaClO), peróxido de hidrógeno (H2O2), etanol (C2H5OH) y biclorurode mercurio (HgCl2), donde el hipoclorito de sodio ha sido el compuesto más frecuentemente usado por varios investigadores con buenos resultados para la desinfección y el establecimiento in vitro del material vegetal, a concentraciones y tiempos diferentes. Este producto es efectivo, económico y de fácil adquisición (BSV, 2010)

Todos los métodos de cultivo de tejidos parten de contar con elmaterial vegetal o explantes bajo condiciones asépticas para garantizar su desarrollo óptimo, por esta razón deben eliminarse todo tipo de microorganismos ajenos (hongos, bacterias); por lo que tanto el material como el medio deben ser esterilizados a fin de evitar cualquier tipo de contaminación (Buitrago, 2004).
Una vez elegida la planta madre, se extraerán los fragmentos a partir de los cuales seobtendrán los explantes (yemas, trozos de hojas, porciones de raíces o semillas). Antes de extraer los explantes se hará una desinfección de los fragmentos de planta madre para eliminar los contaminantes externos. Una vez desinfectado el material vegetal, se debe mantener en condiciones de asepsia, por lo que se trabaja en cabinas de flujo laminar para extraer los explantes a partir del...