Informe de Biologia
Páginas: 4 (935 palabras)
Publicado: 15 de octubre de 2014
TEMA:
OBTENCIÓN Y ANÁLISIS DE FRACCIONES CELULARES
INTEGRANTES:
ROSA CORDOVA VILLODAS
BASILIO PAPUICO ROMERO
PROFESOR:RAFAEL ALVIS
FECHA:
JUEVES: 8:10 – 10:00 AM
2014 - I
1. Introducción
A. Marco Teórico
B.Objetivos
Obtención de fracciones celulares a partir de hígado de pollo.
Determinación del rendimiento y pureza de cada fracción.
Conocer la técnica de fraccionamiento celular para el estudio delas organelas celulares.
Usar colorantes que identifiquen organelas específicas celulares.
Comparar los tipos de microscopía de campo claro y fluorescencia en las muestras preparadas.
2.Procedimiento experimental
A. Materiales
A.1 Materiales del laboratorio
Mortero
Gasa
Tubos ependorf de 1,5mL
2 beaker de 100 ml
Verde de Janus
Cubetas con hielo
1 beaker de50 ml
Buffer Tris 10 mM pH 7,5
Colorante Hoechst 33258
Mytotracker
Láminas y laminillas
Microscopio de campo claro y de fluorescencia.
A.2 Materiales del estudiante
10 gr. dehígado de pollo
B. Procedimientos
El profesor colocó el hígado en el mortero, asegurándose de moler bien y de extraer los ligamentos conjuntamente con la grasa. Realizó con ello una pastauniforme del hígado y seguidamente adiciono 20 ml de la solución buffer Tris (10 mM) HCl pH 7,5. Con una gasa finalmente filtró en un beaker limpio la pasta de hígado.
Transvasamos 250 μl delextracto a 2 tubos eppendorf y agregamos 250 ml de la solución de buffer Tris 10 mM pH 7,5. Rotulamos con la palabra núcleo la laminilla. Centrifugamos a 3000 rpm durante 3 minutos. (El pellet que quedo sedenominaba fracción nuclear y resuspendió en 200 μl de Tris 10 mM pH 7,5 para obtener el pellet con fracción mitocondrial).
Colocamos el sobrenadante del proceso anterior a 2 ependorf nuevos y...
TEMA:
OBTENCIÓN Y ANÁLISIS DE FRACCIONES CELULARES
INTEGRANTES:
ROSA CORDOVA VILLODAS
BASILIO PAPUICO ROMERO
PROFESOR:RAFAEL ALVIS
FECHA:
JUEVES: 8:10 – 10:00 AM
2014 - I
1. Introducción
A. Marco Teórico
B.Objetivos
Obtención de fracciones celulares a partir de hígado de pollo.
Determinación del rendimiento y pureza de cada fracción.
Conocer la técnica de fraccionamiento celular para el estudio delas organelas celulares.
Usar colorantes que identifiquen organelas específicas celulares.
Comparar los tipos de microscopía de campo claro y fluorescencia en las muestras preparadas.
2.Procedimiento experimental
A. Materiales
A.1 Materiales del laboratorio
Mortero
Gasa
Tubos ependorf de 1,5mL
2 beaker de 100 ml
Verde de Janus
Cubetas con hielo
1 beaker de50 ml
Buffer Tris 10 mM pH 7,5
Colorante Hoechst 33258
Mytotracker
Láminas y laminillas
Microscopio de campo claro y de fluorescencia.
A.2 Materiales del estudiante
10 gr. dehígado de pollo
B. Procedimientos
El profesor colocó el hígado en el mortero, asegurándose de moler bien y de extraer los ligamentos conjuntamente con la grasa. Realizó con ello una pastauniforme del hígado y seguidamente adiciono 20 ml de la solución buffer Tris (10 mM) HCl pH 7,5. Con una gasa finalmente filtró en un beaker limpio la pasta de hígado.
Transvasamos 250 μl delextracto a 2 tubos eppendorf y agregamos 250 ml de la solución de buffer Tris 10 mM pH 7,5. Rotulamos con la palabra núcleo la laminilla. Centrifugamos a 3000 rpm durante 3 minutos. (El pellet que quedo sedenominaba fracción nuclear y resuspendió en 200 μl de Tris 10 mM pH 7,5 para obtener el pellet con fracción mitocondrial).
Colocamos el sobrenadante del proceso anterior a 2 ependorf nuevos y...
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