Informe de coprocultivo

INTRODUCCION

Se denomina coprocultivo a la siembra de una muestra adecuada de heces en medios de cultivo apropiados para el desarrollo de bacterias entéricas patógenas. Muestra adecuada es aquella que ha sido recolectada durante el periodo agudo de la enfermedad, cuando es más fácil comprobar presencia de pus, moco o sangre, y antes de la administración de antimicrobianos.
Para realizar elexamen se emplean heces que no tengan más de media hora de obtenidas, o muestras tomadas directamente del recto con un hisopo de algodón.
El coprocultivo o cultivo de heces es el método utilizado usualmente para la investigación de la bacterias productoras de diarrea, aunque, en realidad, solamente es capaz de detectar el agente etiológico en un 60-80% de los procesos, quedando solamente un 20%sin identificar englobados en el término de síndrome diarreico inespecífico.
Dentro del conjunto de la flora normal hay que buscar los microorganismos patógenos eventualmente presentes. En ciertos casos, estos patógenos son abundantes y pueden suplantar casi totalmente a la flora normal, siendo fácil su detención, pero otras veces son poco numerosas y su búsqueda resulta muy, laboriosa, siendoindispensable utilizar técnicas especiales de aislamiento selectivo.
El coprocultivo rutinario va encaminada fundamentalmente a la investigación del entero patógeno más frecuente: Salmonella, shigella y campylobacter, aunque simultáneamente pueden detectarse otros patógenos como Yersinia, Vibrio, Aerononas, Staphylococcus, Cándida, Pseudomonas y otras bacterias, en los mismos medios de cultivo,conviene investigar separadamente, además, otros patógenos frecuentes por otros métodos.

Objetivos:
Conocer la importancia y el procedimiento en un coprocultivo
Identificar las posibles especies patógenas de microorganismos presentes en las vías gastrointestinales (Heces) a través del coprocultivo y de sus reacciones bioquímicas.
Interpretar los mecanismos de acción de los antimicrobianos y losresultados del antibiograma, para así contrarrestar el efecto negativo de las bacterias.

Materiales y equipos
De vidrio
Matraz
Tubos de ensayo
Placas petri
Probeta
Mechero de alcohol
Bagueta

De metal
Mango y asa de siembra(circular y en punta)

De plástico
Pizeta (con agua destilada)
Gradilla

Otros materiales
Papel kraft
Pabilo
Discos de sensibilidad
Agares: Agar MacConckey, Muller Henton, SS, XLD y TBCS.
Medios diferenciales: Medio TSI, LIA, Citrato, Urea, SIM y también agua peptonada.
Para la tinción Gram: Cristal violeta, safranina, lugol, alcohol acetona.
Muestra de heces
Equipos
Microscopio
Estufa esterilizadora
Autoclave.
Preparación de materiales

Preparamos los materiales para llevarlos a esterilizar, colocamos tampones de algodón, cubiertoscon papel Graf y atados con pabilo, durante aproximadamente 1 hora en la estufa esterilizadora.








En la probeta medimos 100ml con agua destilada para el agar Mac Conckey (cada grupo preparo un agar diferente).



Luego vaciamos el agua destilada en el agar Mac Conckey en un frasco de vidrio, lo diluimos bien (con ayuda de la bagueta) y lo llevamos a esterilizar.Dejamos enfriar y vaciamos los agares (agar Mac Conckey, Muller Henton, SS, XLD y TBCS) en las placas petri.
Volteamos las pacas al solidificarse.
Vaciamos en los tubos de ensayo el medio TSI, LIA, Citrato, Urea, SIM y también agua peptonada (en el caso de TSI y LIA el tubo debe estar un poco inclinado antes de solidificarse para que llegue el O2 y en el Citrato debe estar muy inclinado).Coprocultivo I

Procedimiento:
En el vial colocamos un poco de heces y lo diluimos con NaCl 0.9%.
Luego colocamos una pequeña muestra de la dilución, en la lámina porta objeto (una gota en cada extremo de la lámina).
Colocamos una gota de lugol en la lámina y observamos en el microscopio.
Observamos huevos o quistes con la lente en 100x.










Para los medios diferenciales...