Informe de cromatografía

TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS DE SEPARACIÓN DE COMPUESTOS.

Introducción:
La cromatografía es una de las técnicas de separación de compuestos más antiguas que aún se utilizan, además es de las técnicas más conocidas para realizar experimentos de separación. Dentro de las técnicas que se conocen para extraer y separar compuestos, la cromatografía es una de las más eficientes debido a que elmecanismo mediante el cual se separan los componentes es más específico. La separación de compuestos por cromatografía consiste, al igual que la mayoría de técnicas de separación, en dos fases inmiscibles de las cuales una es estacionaria y la otra es móvil, de manera que la separación pueda darse al fluir la fase móvil sobre la fase estacionaria. La fase estacionaria suele ser sólida y la fase móvil,líquida. Los fenómenos que permiten la separación de los compuestos en la cromatografía son, básicamente, la adsorción de los componentes a separar en la fase estacionaria y el arrastre que sufren por el flujo de la fase móvil; la competencia entre dichos fenómenos es lo que produce la separación. (Durst & Gokel, 1985).
Por otra parte, la calidad de la separación cromatográfica depende tambiénde la afinidad de los compuestos con la fase móvil y la estacionaria: los compuestos que son más afines a la fase estacionaria, se adsorberán con mayor facilidad y rapidez, y los más afines a la fase móvil, se arrastrarán una mayor distancia a lo largo de la fase estacionaria. Este es un factor determinante en la separación de compuestos por cromatografía, ya que usualmente los compuestos de lamezcla que se desea separar, tienen diferentes afinidades a cada fase y de esta forma quedarán ubicados en diferentes lugares de la fase estacionaria. (Durst & Gokel, 1985).
Otro aspecto importante que contribuye con la calidad de la cromatografía es el material que compone la fase estacionaria y el disolvente que se utiliza como fase móvil, en la mayoría de los casos el disolvente debe conteneruna parte de agua. Normalmente se utilizan disolventes comunes como el éter de petróleo (mezcla de hexanos y pentanos), acetona, tolueno, ciclohexano y éter etílico entre otros. (Pasto & Johnson, 1981). En cuanto a los adsorbentes (fase estacionaria), los más ampliamente utilizados son la gel de sílice (SiO2) y la alúmina (Al2O3), ambas de carácter polar. El más activo de ellos es la alúmina, yaque retiene los compuestos con más fuerza, es por ello que se utiliza para separar compuestos relativamente apolares como hidrocarburos, haluros de alquilo, éteres, aldehídos y cetonas); en contraparte, la gel de sílicese utiliza para separar sustancias polares usualmente, como por ejemplo alcoholes, aminas y ácidos carboxílicos. Es importante que ninguna de las fases utilizadas reaccione conlos componentes a separar, ya que si no se pierde el compuesto de interés y aparecerán otros productos no deseados.(Universidad Autónoma de Madrid)
Existen diversos tipos de cromatografías, según los compuestos que se desean separar, algunas más específicas que otras, entre las cuales las más utilizadas en los laboratorios de química son la cromatografía de capa fina, la cromatografía de tiza,cromatografía de columna, cromatografía de gases y cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC). La cromatografía de tiza no es tan utilizada debido a su baja eficiencia, la de capa fina es la más común, en ella se utilizan placas cromatográficas como fase estacionaria. La cromatografía de columna tiene la diferencia de que la sílice se coloca en una bureta que funciona como columna, y alagregar el disolvente, éste desciende. Las últimas dos mencionadas son cromatografías más especializadas que requieren sistemas de separación más complejos, en el caso de la cromatografía de gases, la fase móvil está en fase gaseosa, aunque el mecanismo es similar al resto, en el caso de la HPLC se utiliza para separar mezclas de compuestos que son más complejas y difíciles de separar por métodos...