Informe de cromatografia

UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA
FACULTAD DE CIENCIAS
DEPARTAMENTO DE QUIMICA

LABORATORIO DE TÉCNICAS BÁSICAS EN QUÍMICA    COD: 100035-1
CROMATOGRAFIA: CAPA DELGADA Y COLUMNA
PRESENTADO A LOS PROFESORES: Luz Mary Salazar, Félix Moncada
PRESENTADO POR LOS ESTUDIANTES: GRUPO 7
Jenny A. Hernández COD: 1125309
Karen A. Pérez G.      COD: 1125326
 
1. OBJETIVOS
* Conocer lacromatografía como técnica de separación de mezclas de sustancias, sus características y los factores que en ella intervienen.
* Estudiar la incidencia del coeficiente de reparto entre la fase móvil y la fase estacionaria.
* Analizar la influencia del solvente en la separación cromatografíca.
* Observar las diferentes características de la placa en la cromatografía.
* Calcular ycomparar los valores de Rf de las diferentes sustancias tratadas por este método.
* Deducir, a través del R.f., la relación que existe entre la polaridad de las sustancias que se analizan y la de los eluentes utilizados.
* Conocer y aplicar los fundamentos de la cromatografía en columna
* Recolectar las muestras obtenidas por cromatografía en columna y compararlas con los resultadosobtenidos en cromatografía en capa delgada
* Comparar la cromatografía por absorción y por reparto.
* Identificar los componentes de una muestra mediante la comparación de los Rf de la mezcla.
2. METODOLOGIA

CROMATOGRAFIA EN CAPA DELGADA
INICIO
INICIO
2.1 Muestra coloreada

Saturación de la cámara

Saturación de la cámara

Colocar en una cámara un volumen pequeño de la fase móvilseleccionada
Colocar en una cámara un volumen pequeño de la fase móvil seleccionada

Dejar el solvente a una altura aproximada de 3mm de la cámara
Dejar el solvente a una altura aproximada de 3mm de la cámara

Tapar la cámara y dejar en reposo aproximadamente 15 minutos
Tapar la cámara y dejar en reposo aproximadamente 15 minutos

Rotular las cámaras
Rotular las cámaras

A
A

A
A
AA

Siembra de la muestra
Siembra de la muestra
Sacar la cámara cuando se observe que el solvente está a 1 cm del borde superior
Sacar la cámara cuando se observe que el solvente está a 1 cm del borde superior

Con un tubo capilar colocar dos muestras a 1 cm del borde inferior de la placa (lo más separadas posible)
Con un tubo capilar colocar dos muestras a 1 cm del borde inferior de laplaca (lo más separadas posible)

Marcar con lápiz el frente del solvente
Marcar con lápiz el frente del solvente

Medir distancias para calcular el Rf
Medir distancias para calcular el Rf

Dejar secar la muestra
Dejar secar la muestra

Dependiendo de los resultados escoger otra fase móvil hasta lograr una buena separación
Dependiendo de los resultados escoger otra fase móvil hastalograr una buena separación

Desarrollo de la placa
Desarrollo de la placa

Introducir la placa anterior en la cámara saturada
Introducir la placa anterior en la cámara saturada

Tomar las medidas correspondientes
Tomar las medidas correspondientes

Tapar la cámara
Tapar la cámara
FIN
FIN

A
A

INICIO
Repetir el procedimiento anterior
Revelado
1. Luz UV:
Una vez seca la placallevar bajo luz UV a 254nm y 365nm
A
2. Iodo:
Esperar unos minutos hasta que las manchas sean visibles
Colocar las cámaras secar dentro de la cámara de Iodo
FIN
A
Anotar resultados
INICIO
Repetir el procedimiento anterior
Revelado
2. Luz UV:
Una vez seca la placa llevar bajo luz UV a 254nm y 365nm
A
2. Iodo:
Esperar unos minutos hasta que las manchas sean visibles
Colocar lascámaras secar dentro de la cámara de Iodo
FIN
A
Anotar resultados

2.3 muestra incolora

Tomar medidas y calcular Rf
Tomar medidas y calcular Rf

Una vez haya encontrado la fase móvil que permita una buena separación, identificar manchas obtenidas
Una vez haya encontrado la fase móvil que permita una buena separación, identificar manchas obtenidas

CROMATOGRAFIA EN COLUMNA
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