Informe de Laboratorio




Introducción:
El mundo microbiano, hogar de la mayoría de los seres vivos del planeta, representa uno de los campos de estudio más diversos y complejos debido a la gran cantidad de especies existentes y además por la dificultad de la observación y cultivo de la gran mayoría.[1] Por dicho motivo, conocer los fundamentos y las características de los distintos medios de cultivo, así comolas técnicas de tinción de bacterias y las pruebas bioquímicas es muy importante para diferenciar e identificar las distintas bacterias estudiadas.[3]
Objetivos:
Conocer los distintos medios de cultivo, diferenciándolo según las características propias de cada cultivo y poner en práctica los mecanismos para sembrar y aislar bacterias.
Comparar, diferenciar y clasificar las colonias bacterianassegún su morfología macro y micro molecular.
Aplicar las distintas tinciones revisadas en la guía de trabajo, especialmente la tinción Gram, para luego realizar un análisis de las bacterias teñidas.
Mediante el uso de pruebas bioquímicas (para Gram +), en este caso el uso de catalasa y coagulasa, identificar el tipo de bacterias presentes en la flora normal de una persona y clasificarlas.Comparar las características macroscópicas y microscópicas de las colonias bacterianas encontradas (de la flora normal).
La investigación del mundo microbiano se realiza principalmente en laboratorios especialmente equipados y que poseen distintos niveles y características. Existen distintas categorías en las que se clasifican los agentes infecciosos y distintos niveles de bioseguridad para loslaboratorios [10]. Ambos poseen cuatro categorías siendo la primera de menor riesgo, llegando hasta la cuarta, donde se encuentran los microorganismos más peligrosos y las medidas de seguridad más rigurosas. [4]
Para estudiar bacterias, especialmente en la formación de colonias, se utilizan diversos medios de cultivo. En este caso, se utilizaron tres medios distintos: Agar nutriente, agar sangre yagar McConkey. El primero de ellos corresponde a un método corriente, el segundo y el tercero corresponden a métodos especiales; mejorados y selectivos respectivamente.[11]
Para la identificación de los tipos de bacterias estudiadas, además del análisis de colonias y de la observación al microscopio, se pueden realizar distintas tinciones. Las tinciones tienen como finalidad distinguir oclasificar los tipos de bacterias según sus características estructurales.[2] Por ejemplo: la tinción Gram permite diferenciar de manera más precisa las características morfológicas de las bacterias, principalmente la existencia de peptidoglicano en la pared celular[5.6], diferenciando Gram positivas (con una gruesa capa de peptidoglicano), de Gram negativas (con una capa delgada y que existe entre dosmembranas).[5.6] Además, se utilizaron las tinciones de esporas (verde de malaquita) y de cápsula (tinta china) que son específicas para determinar la presencia de esporas o cápsulas en las distintas bacterias.[7,12]
Estas tinciones, especialmente la tinción Gram, es un paso complementario a la utilización de pruebas bioquímicas, en este caso, la prueba de catalasa y coagulasa. Las cuáles sonúnicamente para Gram positivas [5.6] y que permiten diferenciar, Staphylococcus y Micrococcus de Streptococcus; y Staphylococcus aureus de Staphylococcus coagulasa negativo respectivamente. [13]










Materiales y Métodos:
En la realización de los trabajos de laboratorio, es necesario contar con una amplia gama de instrumentos, materiales y muestras de distintos tipos de microorganismos.En este caso, se nombrarán los materiales utilizados en las prácticas de laboratorio, así como las bacterias estudiadas. Lo descrito a continuación, puede encontrarse en la guía de trabajo.
Materiales, instrumentos y bacterias utilizadas:
Aceite de inmersión.
Agar corriente.
Agar McConkey.
Agar sangre.
Agua.
Alcohol-acetona.
Asas de platino.
Bacterias: E.coli; Bacillus cereus;...